 |
Temperatuurregeling is een belangrijke parameter voor veel UV/VIS spectroscopische toepassingen, vooral voor temperatuurgevoelige organische monsters. Deze informatiegids beschrijft waarom dit zo’n belangrijke factor is en illustreert veelgebruikte toepassingen, zoals lipase-activiteit, eiwit-denaturatie, smeltpunt van DNA en Michaelis-Menten kinetiek van bèta-galactosidase.
Deze gids levert ook uitgebreide informatie over de beschikbare thermostateeroplossingen voor de UV/VIS Excellence spectrofotometers van METTLER TOLEDO:
- CuveT – temperatuurregeling voor een enkel monster
- CuvetteChanger – temperatuurregeling voor meerdere monsters
1. Samenvatting
De informatiegids beschrijft het belang van nauwkeurige temperatuurmetingen in UV/VIS spectroscopie, geïllustreerd door vaak gebruikte life science toepassingen. Bovendien worden praktische tips en tricks gegeven voor nauwkeurige UV/VIS metingen bij een hoge temperatuur met accessoires zoals de CuveT en CuvetteChanger voor de UV/VIS Excellence Line van METTLER TOLEDO.
2. Inleiding
Thermostateren in UV/VIS spectroscopie betekent gewoonlijk het verzorgen van specifieke temperatuuromstandigheden a) voorafgaand, b) tijdens of c) na de spectroscopische meting, zoals hieronder staat beschreven:
a) Monsters/analieten moeten soms op een specifieke temperatuur worden gehouden om de ontleding te vertragen of om de ideale omstandigheden te creëren voor een reactie van benodigde voorlopers voor een daaropvolgende (chemische) reactie, die vervolgens op die specifieke temperatuur spectroscopisch wordt geanalyseerd.
b) De temperatuuromstandigheden creëren die constant zijn of veranderen volgens een specifiek verhogingsprotocol. Dergelijke omstandigheden katalyseren chemische reacties, die spectroscopisch gecontroleerd moeten worden.
c) Herstel van eerdere of andere temperatuuromstandigheden voor daaropvolgende spectroscopische metingen om de omkeerbare (chemische) reacties te controleren.
[…]
Lees meer hierover in de Informatiegids Thermostaat UV/VIS analyse correct
3. Toepassingsvoorbeelden van temperatuurafhankelijke UV/VIS spectroscopie
3.1 Bepaling van de lipase-activiteit
Bepaling van de lipase-activiteit is een voorbeeld waarin een temperatuur die hoger is dan de omgevingstemperatuur nodig is om de ideale voorwaarden te creëren voor een enzym-gekatalyseerde chemische reactie die spectroscopisch gecontroleerd moet worden.
[…]
3.2 Temperatuur-geïnduceerde eiwit-denaturatie
[…]
3.3 Michaelis-Menten kinetiek van bèta-galactosidase
[…]
3.4 Smelttemperatuur van DNA
[…]
Lees meer hierover in de Informatiegids Thermostaat UV/VIS analyse correct
4. CuveT Peltier Thermostaterende Unit van METTLER TOLEDO
CuveT is thermo-elektrische (Peltier-gebaseerde) thermostaat met een enkele kuvet die de temperatuur in het bereik van 4 tot 95°C in UV/VIS spectroscopie-toepassingen op efficiënte wijze regelt. Dit thermostaterende systeem kan aangesloten worden op de UV7, UV5Bio en UV5 UV/VIS Excellence spectrofotometers van METTLER TOLEDO. De unit wordt bovenop de spectrofotometer geplaatst en voor de installatie is geen gereedschap nodig.
[…]
Lees meer hierover in de Informatiegids Thermostaat UV/VIS analyse correct
5. Praktische tips en tricks voor thermostateren met CuveT
In dit hoofdstuk staan praktische tips en tricks voor routinematig gethermostateerde UV/VIS spectrostopische metingen met CuveT, op basis van veelgestelde vragen.
[…]
Lees meer hierover in de Informatiegids Thermostaat UV/VIS analyse correct
6. Thermostateren met de CuvetteChanger van METTLER TOLEDO
De CuvetteChanger van METTLER TOLEDO maakt het mogelijk om tot 8 kuvetten op efficiënte en automatische wijze te meten, voor metingen met blanco subtractie en voor complexe kinetiek-toepassingen. Met gebruik van een externe thermostaat is het mogelijk om monsters in kuvetten bij een temperatuur van 10-80°C te thermostateren.
[…]
Lees meer hierover in de Informatiegids Thermostaat UV/VIS analyse correct
7. Naslagwerk
[1] www.mt.com/uv-vis
[2] www.mt.com/cuvet-peltier-uvvis
[3] Determination of Lipase Activity, Method PNAB-LIP39, Biocon Española S.A.
[4] Journal of Chemical Education, March 2000, DOI: 10.1021/ed077p 380
[5] 1. Enzyme Handbook, II, Barman, T. E., Springer- Verlag (Berlin-Heidelberg: 1969), p. 581.
