Pipetage 96 puits pour une identification précoce des maladies
Des chercheurs ont récemment développé une méthode plus précise d'identification de certaines maladies lysosomales chez les nouveau-nés. Le Liquidator 96 de Rainin accélère la préparation d'échantillons et garantit une grande précision de diagnostic de ces maladies génétiques.
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Les maladies lysosomales sont une famille de maladies dont les symptômes débilitants peuvent être bénins comme très importants. Ces maladies sont généralement causées par une mutation des protéines qui interviennent dans le fonctionnement des lysosomes. L' intensité des symptômes dépend des protéines ayant muté, de la façon dont elles ont muté, des différents facteurs qui contrôlent l'expression génétique et des facteurs environnementaux.
Il existe souvent un retard dans le diagnostic et le traitement des maladies lysosomales en raison de leur tableau clinique variable et leurs symptômes non spécifiques.
Diagnostic des maladies lysosomales par spectrométrie de masse en tandem
Dans l'article paru dans la revue Journal of Pediatrics, intitulé "Identification of Infants at Risk for Developing Fabry, Pompe or Mucopolysaccharidosis-I from Newborn Blood Spots by Tandem Mass Spectrometry" (Identification des nourrissons à risque de développer une maladie de Fabry, une glycogénose généralisée ou une mucopolysaccharidose de type I à partir de gouttes de sang séché de nouveau-nés par spectrométrie de masse en tandem), Scott et ses collaborateurs ont mis au point une méthode qui utilise la spectrométrie de masse pour dépister de nombreuses maladies lysosomales en parallèle. Ils ont commencé par faire sécher des gouttes de sang de nouveau-nés, dans lesquelles de nombreuses enzymes lysosomales conservent leur activité, puis les ont remises en suspension dans un tampon contenant les substrats enzymatiques appropriés pour les enzymes dont la déficience provoque les maladies. L'utilisation de la spectrométrie de masse en tandem a permis à l'équipe de déterminer si un nourrisson donné présentait une déficience pour une activité enzymatique en particulier. En fonction de l'activité de l'enzyme dans une goutte de sang séché donnée, les auteurs ont analysé les séquences des gènes des nouveau-nés afin de confirmer si une faible activité enzymatique mesurée lors du test était corrélative des mutations dans la même enzyme. Scott et ses collaborateurs ont constaté que leur méthode accroît la probabilité de détection de la maladie de Fabry, la glycogénose généralisée et la mucopolysaccharidose de type I par rapport au diagnostic clinique standard.
Liquidator 96 – l'instrument adapté
Les expériences ont nécessité l'analyse de plus de 100 000 gouttes de sang séché. Un nombre d'échantillons aussi élevé imposait une méthode de préparation précise et systématique des échantillons. De petits fragments de chaque goutte de sang séché ont été placés dans une plaque 96 puits. Le Liquidator 96 de METTLER TOLEDO a permis aux chercheurs d'ajouter dans la plaque la solution de réaction enzymatique, la solution d'arrêt de la réaction et les solvants d'extraction du produit, rapidement et avec précision. Ces échantillons ont ensuite été utilisés pour la spectrométrie de masse en tandem.
Le système Liquidator 96 est un instrument de pipetage 96 puits hautement précis qui ne requiert pas de source d'alimentation pour fonctionner. Avec 96 canaux de pipetage fonctionnant en simultané, le Liquidator 96 permet d'accélérer de manière significative les procédés expérimentaux au-delà de ce qui est possible avec des pipettes monocanal et multicanaux. Dans les applications où le facteur temps est crucial, comme les réactions enzymatiques, il est particulièrement important que la réaction soit déclenchée en même temps dans l'ensemble des 96 puits. Le Liquidator s'acquitte de cette tâche simplement et avec précision, et évite le risque de sauter des lignes, un cas de figure courant avec le pipetage multicanaux dans les plaques 96 puits.