Hiệu chuẩn máy đo quang phổ UV Vis

Máy đo quang phổ UV/VIS Excellence được kiểm tra theo các quy trình được xác định trong Dược điển Hoa Kỳ (USP) 43 – NF 38 và Dược điển Châu Âu (Ph. Eur.) Ed. 10. Kiểm tra bao gồm các thông số sau:

• Độ chính xác của bước sóng
• Độ chính xác của trắc quang
• Khả năng lặp lại của trắc quang
• Độ tuyến tính của trắc quang*
• Ánh sáng lạc
• Độ phân giải

Ngoài ra, các thông số không được yêu cầu bởi USP và Ph. Eur. cũng được kiểm tra:

• Khả năng lặp lại của bước sóng
• Độ nhiễu của trắc quang
• Độ phẳng đường nền
• Độ biến dạng của trắc quang

Tính toàn diện của các kiểm tra đảm bảo đánh giá tất cả các khía cạnh về hiệu suất của máy đo quang phổ. Máy đo quang phổ UV7 Excellence của chúng tôi tuân thủ các yêu cầu nghiêm ngặt được mô tả chi tiết hơn dưới đây.

*Độ tuyến tính trắc quang không còn được đề cập rõ ràng trong phiên bản thứ 43. Độ chính xác trắc quang phải được kiểm tra trong phạm vi hoạt động dự kiến. Do đó, METTLER TOLEDO vẫn khuyến nghị thử nghiệm độ tuyến tính trắc quang.

Độ chính xác của bước sóng đánh giá khả năng thiết bị tái tạo các bước sóng một cách chính xác. Phép đo độ chính xác của bước sóng giúp xác định xem có sự dịch chuyển sai lệch của trục bước sóng hay không.

Các chất tham chiếu phù hợp để xác định độ chính xác của bước sóng phải thể hiện các đỉnh hẹp và được xác định rõ. Dung dịch oxit holmi thường được sử dụng cho mục đích này.

USP và Ph. Eur. nêu các tiêu chí chấp thuận khác nhau tùy theo chất tham chiếu được sử dụng và phạm vi bước sóng của chúng. Đối với chất tham chiếu dạng lỏng, áp dụng các tiêu chí sau:

USP: ±1 nm dưới 400 nm; ±2 nm trên 400 nm
Ph. Eur.: ±1 nm dưới 400 nm; ±3 nm trên 400 nm

Theo USP và Ph. Eur., độ chính xác của bước sóng, hoặc khả năng lặp lại, không được yêu cầu cho máy đo quang phổ dựa trên phổ Array. Nhờ không có bộ phận chuyển động, nên các thiết bị dựa trên phổ Array không bị sai lệch giữa các phép đo.

Độ chính xác của trắc quang là thước đo khả năng của thiết bị để đo độ hấp thụ một cách chính xác và trả về giá trị hấp thụ gần với giá trị thực.

Độ chính xác của trắc quang có thể được xác định bằng cách đo các bộ lọc rắn hoặc lỏng có giá trị nồng độ và độ hấp thụ đã biết và so sánh độ hấp thụ đo được với các giá trị hấp thụ tham chiếu.

Dung dịch kali dicromat (PDC) 60 mg/L được sử dụng cho phạm vi tử ngoại, trong khi bộ lọc đen trung tính 0,5 (ND) bao gồm phạm vi có thể nhìn thấy. Các tiêu chí chấp thuận giống nhau cho cả hai dược điển và phụ thuộc vào mức độ hấp thụ của chất tham chiếu.

PDC: ±0,010 A dưới 1,0 A; ±1,0% (0.010*A) trên 1,0 A
ND: ±0,008 A dưới 1,0 A; ±0,8% (0.008*A) trên 1,0 A

Theo USP và Ph. Eur., độ chính xác của bước sóng, hoặc khả năng lặp lại, không được yêu cầu cho máy đo quang phổ dựa trên phổ Array. Nhờ không có bộ phận chuyển động, nên các thiết bị dựa trên phổ Array không bị sai lệch giữa các phép đo.

Khả năng lặp lại của trắc quang, còn được gọi là độ chính xác của trắc quang theo USP, xác định công suất của máy đo quang phổ để trả về các giá trị hấp thụ qua nhiều phép đo theo cách đáng tin cậy và có thể lặp lại.

Các chất tham chiếu giống nhau được dùng để xác định độ chính xác của trắc quang được sử dụng. Các bộ lọc được đo sáu lần và độ lệch chuẩn trên tất cả các phép đo được tính toán để đánh giá khả năng lặp lại.

Độ lệch chuẩn, không được vượt quá 5 mA dưới 1 A hoặc 0,5% trên 1 A, bất kể chất tham chiếu được sử dụng hoặc phạm vi bước sóng.

Lưu ý: khả năng lặp lại của trắc quang không được yêu cầu bởi Ph. Eur.

Độ tuyến tính của trắc quang là thước đo độ tuyến tính của các giá trị đo được (ví dụ: độ hấp thụ) như là một chức năng tăng nồng độ. Điều này đặc biệt quan trọng đối với các ứng dụng định lượng.

Tuy nhiên, độ tuyến tính của trắc quang có thể được xác định bằng cùng một quy trình và bộ lọc được sử dụng để xác định độ chính xác của trắc quang, ở ba nồng độ/bộ lọc khác nhau nằm trong phạm vi từ 0 A đến 2 A được sử dụng.

USP và Ph. Eur. nêu các tiêu chí chấp thuận khác nhau cho độ tuyến tính của trắc quang:

Ph. Eur.: hệ số tương quan R2 phải vượt quá 0,999.
USP: các giá trị đo được ở tất cả các nồng độ/bộ lọc phải đáp ứng các tiêu chí về độ chính xác của trắc quang.

Ánh sáng lạc được xác định là ánh sáng chiếu tới máy dò, không phải là một phần của phân tích. Ánh sáng lạc gây ra độ chênh lệch ở bước sóng tương ứng nhưng không bắt nguồn từ sự góp phần của mẫu được đo. Do đó, độ hấp thụ của mẫu bị thay đổi bởi ánh sáng lạc và kết quả của mẫu bao gồm cả lỗi hệ thống.

Ánh sáng lạc được xác định bằng cách đo bộ lọc cắt (dung dịch kali clorua chứa nước) bằng cách sử dụng cả phương pháp bước sóng cụ thể (SWM) và phương pháp tỷ lệ lọc dung dịch (SFRM).

Các tiêu chí chấp thuận được nêu bởi USP và Ph. Eur. đối với KCl như sau:

SWM: A tối đa ≥ 2,0 A
SFRM: A tối đa ≥ 0,7 A

Độ phân giải xác định khả năng phân giải của máy đo quang phổ UV Vis và khả năng phân giải các cấu trúc lân cận trong phổ.

Độ phân giải được xác định bằng cách đo dung dịch Toluen trong Hexan. Mức hấp thụ tối thiểu và tối đa của đỉnh và độ phân giải cao nhất được sử dụng để đánh giá độ phân giải.

USP nêu rõ rằng tỷ lệ giữa độ hấp thụ tối thiểu và tối đa tại các bước sóng tương ứng là 267 và 269 nm phải vượt quá 1,3 để cung cấp đủ độ phân giải, trong khi tiêu chí chấp thuận của Ph. Eur. được nêu trong chuyên khảo riêng.

Không giống như việc quét máy đo quang phổ UV Vis, các thiết bị dựa trên phổ Array không có khe vật lý để xác định dải thông phổ (SBW) của thiết bị một cách cơ học. SBW tương đương của một thiết bị phổ Array có thể được tính từ độ phân giải của thiết bị.
Ví dụ, độ phân giải của máy đo quang phổ UV7 Excellence là ≥ 1,9, tương ứng với SBW ≤ 1,0 nm.

Các kiểm tra được xác định phía trên có thể được thực hiện thủ công hoặc tự động, tuy nhiên các phương pháp thủ công có nguy cơ giảm độ chính xác vốn có. Quy trình làm việc thủ công rất tốn thời gian và dễ bị lỗi. Xác minh hiệu suất tự động cung cấp các lợi ích sau:

• Kết quả nhanh hơn với tài liệu có thể truy xuất và thẩm định kết quả.
• Thực hiện quy trình làm việc và có thể tránh được lỗi xử lý dữ liệu, không cần phải lặp lại các kiểm tra.
• Tuân thủ các tiêu chuẩn về tính toàn vẹn dữ liệu. Đây là một lợi ích đáng kể liên quan đến việc quản lý dữ liệu tuân thủ theo FDA.
• Thu lại lợi tức đầu tư nhanh nhờ tăng năng suất và tính bảo mật.

Tuân thủ quy định là mục tiêu chính cho tất cả các nhà sản xuất dược phẩm và nhà cung cấp của họ. Theo GMP, các quy trình sản xuất và phương pháp phân tích cần được thẩm định, đồng thời thiết bị được sử dụng để sản xuất và kiểm soát chất lượng cần được đánh giá cùng một lúc.

Để hỗ trợ khách hàng đáp ứng yêu cầu tuân thủ này, METTLER TOLEDO cung cấp EQPac cho máy đo quang phổ UV/VIS Excellence. EQPac là một giải pháp dịch vụ được thiết kế đặc biệt để giải quyết các mối lo ngại về việc tuân thủ trong môi trường pháp lý khắt khe ở thời điểm hiện tại. EQPac cung cấp dịch vụ tại chỗ, lập tài liệu đầy đủ, lắp đặt và đánh giá chuyên nghiệp để đảm bảo tuân thủ quy định và hoạt động đáng tin cậy.

Tìm hiểu thêm về dịch vụ đánh giá thiết bị và dịch vụ hiệu chuẩn máy đo quang phổ UV/VIS của chúng tôi.