 |
Контроль температуры в процессе спектроскопического анализа имеет большое значение, особенно для органических образцов, чувствительных к температуре. В руководстве дано обоснование важности этого параметра и приведены типичные примеры: анализ активности липазы, денатурация протеинов, определение точки плавления ДНК и кинетический анализ бета-галактосидазы по модели Михаэлиса — Ментен.
В руководстве также содержится информация о доступных решениях для термостатирования образцов в спектрофотометрах УФ-ВИД Excellence МЕТТЛЕР ТОЛЕДО:
- CuveT — для термостатирования одного образца.
- CuvetteChanger — для термостатирования нескольких образцов.
1. Краткий обзор
Основываясь на типичных примерах из медико-биологической сферы, в руководстве демонстрируется важность точного контроля температуры при УФ-ВИД спектроскопии. Также приведены советы и рекомендации для повышения точности УФ-ВИД спектроскопии при повышенных температурах с помощью принадлежностей CuveT и CuvetteChanger для УФ-ВИД спектрофотометров МЕТТЛЕР ТОЛЕДО серии Excellence.
2. Введение
Термостатирование при УФ-ВИД спектроскопии подразумевает создание и поддержание заданного температурного режима перед, во время и после спектроскопического исследования. Ниже приведен пример:
а) Образцы/аналиты можно содержать при определенной температуре, чтобы замедлить разложение или создать идеальные условия для реакции прекурсоров, необходимых для последующей химической реакции, которая будет исследоваться при требуемой температуре.
b) Можно создать температурные условия, которые, в соответствии с протоколом эксперимента, будут постоянными или изменяющимися. Такие условия катализируют химическую реакцию, исследуемую с помощью спектроскопии.
c) Можно задать начальные температурные условия для последующего спектроскопического исследования обратимой химической реакции.
[…]
Узнайте больше из руководства «УФ-ВИД спектроскопия: правила надлежащего термостатирования».
3. Примеры применения термозависимой УФ-ВИД спектроскопии
3.1 Определение активности липазы
Определение активности липазы является отличным примером того, как повышение температуры улучшает условия для химических реакций, катализируемых энзимами и подлежащих спектрофотометрическому исследованию.
[…]
3.2 Термическая денатурация протеинов
[…]
3.3 Кинетический анализ бета-галактосидазы по модели Михаэлиса — Ментен
[…]
3.4 Точка плавления ДНК
[…]
Узнайте больше из руководства «УФ-ВИД спектроскопия: правила надлежащего термостатирования».
4. Внешний термостат Пельтье CuveT МЕТТЛЕР ТОЛЕДО
CuveT — это термоэлектрический термостат Пельтье для одной кюветы, который обеспечивает эффективное регулирование температуры в диапазоне от 4 до 95 °C при УФ-ВИД спектроскопии. Система термостатирования совместима с УФ-ВИД спектрофотометрами МЕТТЛЕР ТОЛЕДО Excellence UV7, UV5Bio и UV5. Модуль крепится на спектрофотометр. Инструменты для установки не требуются.
[…]
Узнайте больше из руководства «УФ-ВИД спектроскопия: правила надлежащего термостатирования».
5. Практические советы и рекомендации для термостатирования с помощью CuveT
В данной главе содержатся практические советы и рекомендации в формате ответов на часто задаваемые вопросы по термостатированию во время исследований с помощью УФ-ВИД спектрометра.
[…]
Узнайте больше из руководства «УФ-ВИД спектроскопия: правила надлежащего термостатирования».
6. Термостатирование с помощью CuvetteChanger МЕТТЛЕР ТОЛЕДО
Автоподатчик кювет CuvetteChanger МЕТТЛЕР ТОЛЕДО позволяет автоматически выполнять до восьми измерений в серии как для стандартных образцов с учетом холостой пробы, так и для сложных кинетических исследований. С помощью внешнего термостата температуру образцов в кюветах можно установить в пределах от 10 до 80 °C.
[…]
Узнайте больше из руководства «УФ-ВИД спектроскопия: правила надлежащего термостатирования».
7. Литература
[1] www.mt.com/uv-vis.
[2] www.mt.com/cuvet-peltier-uvvis.
[3] Determination of Lipase Activity, Method PNAB-LIP39, Biocon Española S.A.
[4] Journal of Chemical Education, March 2000, DOI: 10.1021/ed077p 380.
[5] 1. Enzyme Handbook, II, Barman, T. E., Springer- Verlag (Berlin-Heidelberg: 1969), p. 581.
