يمثل التحكم في درجة الحرارة عاملاً مهمًا في العديد من تطبيقات التحليل الطيفي للأشعة المرئية وفوق البنفسجية، وخاصةً عند العمل على العينات العضوية الحساسة لدرجة الحرارة. يصف هذا الدليل لماذا يعد ذلك عاملاً مهمًا بينما يوضح اتطبيقات شائعة الاستخدام مثل نشاط الليباز وتمسخ البروتين ودرجة ذوبان DNA وحركيات Michaelis-Menten لغالكتوسيداز بيتا.
كما يوفر هذا الدليل معلومات تفصيلية حول حلول ضبط الثرموستات لأجهزة Excellence لقياس الطيف الضوئي بالأشعة المرئية/فوق البنفسجية من شركة METTLER TOLEDO:
- CuveT – وحدة تحكم فردية في درجة حرارة العينة
- CuvetteChanger – وحدة تحكم متعددة في درجة حرارة العينة
1. ملخص تنفيذي
يصف هذا الدليل أهمية القياس الدقيق لدرجة الحرارة في التحليل الطيفي للأشعة المرئية/فوق البنفسجية موضح بواسطة أمثلة للتطبيقات شائعة الاستخدام في علوم الحياة. إضافةً إلى ذلك، يتم توفير نصائح وتلميحات عملية لإجراء قياسات دقيقة بالأشعة المرئية/فوق البنفسجية في درجات حرارة متصاعدة وباستخدام ملحقات، مثل CuveT وCuvetteChanger لمجموعة منتجات METTLER TOLEDO UV/VIS Excellence.
2. مقدمة
إن ضبط الثرموستات في التحليل الطيفي للأشعة المرئية/فوق البنفسجية يعني عمومًا وضع ظروف محددة لدرجة الحرارة أ) قبل أو ب) أثناء و ج) بعد قياس التحليل الطيفي، كما هو موضح بالأمثلة أدناه:
أ) قد يتعين الاحتفاظ بالعينات/مواد التحليل في درجة حرارة مضبوطة بدقة لتأخير التحلل أو لتوفير الظروف المثالية لتفاعل الطلائع اللازمة لتفاعل (كيميائي) لاحق، حيث يتم بعد ذلك تحليله طيفيًا في درجة الحرارة المحددة.
ب) تعيين ظروف درجة الحرارة، والتيتكون ثابتة أو تتغير وفقًا لبرنامج منحدر درجة الحرارة. وتعمل هذه الظروف على تحفيز التفاعلات الكيميائية والتي يجب مراقبتها بتحليلها طيفيًا.
ج) إعادة تعيين الظروف السابقة لدرجة الحرارة أو ظروف مختلفة لإجراء قياسات طيفية لاحقة من أجل مراقبة التفاعلات (الكيميائية) القابلة للعكس.
[…]
احصل على مزيد من المعلومات في دليل تحليل الأشعة المرئية/فوق البنفسجية للثرموستات مباشرةً
3. أمثلة تطبيقية للتحليل الطيفي للأشعة المرئية/فوق البنفسجية المعتمد على درجة الحرارة
3.1 قياس نشاط الليباز
يعمل قياس نشاط الليباز كمثال حيث يجب توفر درجات حرارة متصاعدة أعلى من الظروف المحيطة لتعيين الظروف المثالية للتفاعل الكيميائي المحفز بواسطة الإنزيم والذي يجب مراقبته بتحليله طيفيا.
[…]
3.2 تمسخ البروتين المستحث بواسطة درجة الحرارة
[…]
3.3 حركيات Michaelis-Menten لغالكتوسيداز بيتا
[…]
3.4 درجة حرارة ذوبان DNA
[…]
احصل على مزيد من المعلومات في دليل تحليل الأشعة المرئية/فوق البنفسجية للثرموستات مباشرةً
4. وحدة ضبط ثرموستات بلتييه باستخدام METTLER TOLEDO CuveT
CuveT عبارة عن ثرموستات مزود بحامل كوفيت فردي حراري كهربي (معتمد على بلتييه) يقوم بكفاءة بالتحكم في درجة الحرارة في نطاق يتراوح ما بين 4 درجات مئوية و95 درجة مئوية في تطبيقات التحليل الطيفي للأشعة المرئية/فوق البنفسجية. ويمكن توصيل نظام ضبط الثرموستات هذا بأجهزة UV5 UV/VIS Excellence وUV5Bio وUV7 لقياس مطيافية الأشعة المرئية وفوق البنفسجية من شركة METTLER TOLEDO. وتوضع الوحدة أعلى مقياس الطيف الضوئي ولا حاجة لاستخدام أي أدوات في التركيب.
[…]
احصل على مزيد من المعلومات في دليل تحليل الأشعة المرئية/فوق البنفسجية للثرموستات مباشرةً
5. نصائح وتلميحات عملية لضبط الثرموستات باستخدام CuveT
يوفر هذا الفصل نصائح وتلميحات عملية لقياسات التحليل الطيفي للأشعة المرئية/فوق البنفسجية المضبوطة بالثرموستات المعتادة باستخدام CuveT على أساس أسئلة متداولة.
[…]
احصل على مزيد من المعلومات في دليل تحليل الأشعة المرئية/فوق البنفسجية للثرموستات مباشرةً
6. ضبط الثرموستات باستخدام METTLER TOLEDO CuvetteChanger
تتيح METTLER TOLEDO CuvetteChanger القياس الأوتوماتيكي الفعال لسلسلة تصل إلى 8 حوامل كوفيت سواء للقياسات ذات جدول الطرح الفارغ التقليدي أو تطبيقات الحركيات المعقدة. بفضل استخدام ثرموستات خارجي، يمكن قياس حرارة العينات في حوامل الكوفيت في نطاق حرارة يتراوح ما بين 10 إلى 80 درجة مئوية.
[…]
احصل على مزيد من المعلومات في دليل تحليل الأشعة المرئية/فوق البنفسجية للثرموستات مباشرةً
7. المراجع
[1] www.mt.com/uv-vis
[2] www.mt.com/cuvet-peltier-uvvis
[3] Determination of Lipase Activity, Method PNAB-LIP39, Biocon Española S.A.
[4] Journal of Chemical Education, March 2000, DOI: 10.1021/ed077p 380
[5] 1. Enzyme Handbook, II, Barman, T. E., Springer- Verlag (Berlin-Heidelberg: 1969), p. 581.