如何正確使用移液器?

準確的移液需要掌握一些基本技術。這些包括:

  • 根據吸頭尺寸和液體類型,將移液器吸頭浸入液體中至正確深度
  • 用要吸入的液體預沖洗新鮮的吸頭
  • 將移液器保持在適當的角度(垂直方向不超過20°) 
  • 以最大程度減少氣泡形成的速度吸氣和分配
  • 休息一下,避免手部過度加熱儀器,這可能是由於長時間使用而導致的,並通過膨脹移液器內的空氣而影響準確性


為什麼準確的移液很重要?

大多數生命科學應用都包括關鍵的液體處理步驟,在這些步驟中,移液量直接影響結果。如果移液不一致且不準確,那麼時間、金錢和材料就會被浪費掉。準確的移液是可重複工作的基礎,這對於生成有意義的數據至關重要。

如何提高移液準確度並減少誤差?

提高移液精度的第一步是選擇正確的移液器類型和適當的體積範圍。對於尺寸,請選擇適合您移液體積的最小容量移液器。例如,如果您要移液 2 μL,並且有 5 μL 移液器和 20 μL 移液器,則使用 5 μL 可以獲得更高的準確度。 

查看這份關於移液器選擇 的白皮書 ,瞭解哪種移液器最適合液體和其他特定因素: 選擇合適的移液器

一旦您擁有了合適的儀器,請將您良好的移液技術付諸實踐。制定例行測試計劃,以最大限度地提高對結果的信任度,並且與任何精密儀器一樣,確保制定定期的專家服務和校準方案。

快速測試移液器準確性的最簡單方法可能是Rainin SmartCheck。在 mt.com/SmartCheck 瞭解更多資訊

我如何知道要使用哪種移液器?

選擇合適的 移液器 需要評估您的要求。首先,您要移液什麼樣的樣品?它們是水性的嗎?或者它們是粘性的、揮發性的、起泡的、腐蝕性的還是危險的?對於含水和近含水液體,最常見的空氣置換移液器(也稱為“氣墊”移液器)是一個不錯的選擇。對於粘性、揮發性和其他不尋常的液體類型,外置活塞式移液器在準確性和安全性方面都是更好的選擇。 

您將移液的體積是多少?從一個容器轉移到另一個容器需要多少個樣品?查看這份 關於移液器選擇的白皮書 ,瞭解哪種移液器效果最佳,具體取決於液體和您具體情況的其他因素。

如何移液小體積?

移液盡可能小的體積需要專門的儀器和技術。重複移液器可能是重複分配體積低至 100 nL 的最佳選擇。另一支移液器也只能用於少量分液。確保使用最小尺寸的移液器,以適應您要移液的體積。 

在非常低的量程下,移液技術對準確度和重現性的影響更大。浸入深度、移液角度和吸液速率對於控制很重要。Rainin 的 移液技術海報 可以提供説明。

Rainin NanoRep 重複分配低至 100 nL 的等分試樣。在這裡瞭解更多資訊: mt.com/NanoRep

如何使用多通道移液器?

在準確、可重複的多通道移液中,最重要的因素是移液器每個通道的密封完整性。這意味著每個尖端都完美地貼合每個軸,零漏氣。不同的製造商以不同的方式實現這一目標,具有不同的人體工程學難易程度和密封一致性水準。Rainin的LTS LiteTouch系統移液器吸頭從多通道載入和彈出所需的力最小,並且每次都能始終如一地密封。

按兩下此處查看Rainin的各種多通道移液器。

握持移液器的正確方法是什麼?

吸氣時,將移液器盡可能接近垂直方向,避免偏離 Y 軸 20° 以上的任何角度。分配時,如果您要接觸目標容器的壁以完全從尖端拉出所有液體,則可以超過 20° 角。

什麼是正向移液和反向移液?

正向移液是標準的移液技術,也是水性樣品的最佳選擇。對於粘性和揮發性樣品,反向移液可提供更高的準確性。

要向前移液器,請將柱塞向下推到第一個擋塊,同時將移液器保持在液體外。然後,將尖端浸入您正在使用的液體中 2-10 毫米深——不要更深。緩慢鬆開柱塞至完全伸展以吸出全部液體體積。要將移液器分液到目標容器中,請將移液器移入容器中,然後以均勻的速度按壓柱塞,通過第一個擋塊一直壓到第二個擋塊 - 直到柱塞所向。在柱塞完全按壓的情況下,將移液器的尖端輕輕拖動到容器壁上以“接觸”。這有助於完全分配全部液體體積。鬆開柱塞,彈出移液器吸頭,裝入新的移液器吸頭,然後重複。

要反向移液器,請將柱塞一直向下推,從第一個擋塊向下推到第二個擋塊 - 直到柱塞的長度。然後,將尖端浸入液體中,緩慢均勻地釋放柱塞以吸氣。移動到接收容器並僅將柱塞按到第一個停止以分配正確的體積。移液器吸頭中將殘留少量殘留物。將移液器移到丟棄分配容器上,然後將柱塞的其餘部分向下按壓至第二個擋塊,也稱為「吹出」擋塊,以釋放任何剩餘的液體。 

鬆開柱塞,彈出移液器吸頭,裝入新的移液器吸頭,然後重複。

如何移液粘稠液體?

空氣置換式移液器可用於移液微粘稠液體,包括血液。為了達到最高精度,請使用上述反向移液技術。對於粘度更高的液體,如85%甘油或Triton X-100,外置活塞式移液器具有最佳的準確性和一致性。

如何移液揮發性液體?

乙醇等微揮發性液體可以使用上述反向移液技術用空氣置換移液器移液。然而,外置活塞式移液器是揮發性液體的更好選擇。 

如果使用空氣置換式移液器,請在移液量之前至少預沖洗移液器吸頭(吸液和分液)五次。這樣可以平衡移液器內的空氣,減慢液體的蒸發速度。揮發性液體的快速蒸發會使移液器內的空氣膨脹,並迫使液體從吸頭流出,而不會對柱塞施加任何壓力,這會降低準確的體積輸送。

揮發性液體(如乙腈)通常最好使用外置活塞移液管處理。

移液會產生氣溶膠嗎?

是的,使用空氣置換移液器移液會產生氣溶膠。氣溶膠會上升到移液器內部並污染內壁和活塞。當柱塞在抽吸過程中釋放得太快時,更容易發生霧化,並且在分液器過快的情況下也可能以相反的方向發生。 

為了盡量減少氣溶膠,請緩慢均勻地吸出和分配。使用過濾的提示。 

外置活孔式移液器使用注射器式吸頭,可防止霧化。外置活孔移液器是移液危險液體和任何高粘度或揮發性液體的最佳選擇。

液體溫度如何影響移液?

極冷或極熱的液體會改變空氣置換移液器內的氣壓,導致移液不準確。 

外置活塞式移液器採用注射器式吸頭,液體和活塞之間沒有氣穴,不受不同液體溫度的影響。外置活孔移液器可在非室溫液體中提供準確的結果。

如果您必須使用空氣置換式移液器移液非常熱或非常冷的液體,請不要預先沖洗移液器吸頭 - 這通常是獲得最高精度的最佳實踐。相反,應迅速吸出和分配,以盡量減少液體溫度對移液器內部氣隙的影響。

移液時如何避免氣泡?

為避免移液時出現氣泡和起泡,請勿將吸頭浸入儲液器中超過 10 毫米,並緩慢吸氣。

反向移液提供了額外的保護,因為在吸氣之前,您需要將柱塞完全壓到第二個擋塊,因此沒有機會將空氣注入液體樣品中。有關反向移液的更多資訊,請訪問 此頁面。 

外置活塞式移液器在與液體相互作用時不會產生氣泡或泡沫,因為其注射器式吸頭不會為液體提供與之相互作用的空氣。

對移液器進行凈化的最佳方法是什麼?

用濕布和異丙醇或 10% 漂白劑溶液等清潔劑擦拭移液器,對移液器進行消毒。避免使用千分尺的透明塑膠視窗。

高壓滅菌可能是另一種選擇,但請檢查移液器的儀器規格。如果是高壓滅菌的,是整個儀器高壓滅菌還是僅高壓滅菌?  通常,只有液體端可以高壓滅菌。

有關清潔移液器的更多資訊,請獲取 清潔移液器 海報。

如何校准移液器?

校準是對移液器的系統誤差率(準確度)和隨機誤差率(精密度)進行受控和記錄的測量。在許多實驗室環境中,移液器的性能必須定期進行測試,並在經認可機構認證的特定條件下依法記錄。 

ISO認證的供應商在受控環境中校准移液器。結果安全地記錄在校準證書上,為每台儀器提供可審計的性能歷史記錄。當需要調整時,ISO 認證的校準實驗室會提供製造商推薦的零件和潤滑劑的專家服務。 

Rainin 和梅特勒-托利多是全球最大的移液器服務機構,提供 郵寄和現場服務選項的快速周轉。服務實驗室已通過 ISO 17025 認證,程式遵循 2022 年 ISO 8655 更新。 

如何計算移液器的準確度和精密度?

移液器準確度(或現在稱為真實度)是所有測量值(4-10 次測量值)的平均體積與設定體積之間的差值。 

精度是所執行的所有測量的標準偏差。其他讀數與每個讀數相差多遠?

如何計算移液器的不確定度?

移液器的不確定度是其整體準確性的定量術語。它是真實性(系統誤差的度量)和精確度(隨機誤差的度量)的組合。 

不確定性的方程為: 

不確定度 = 系統誤差 + 隨機誤差 * k. k(覆蓋因數或 Z 分數)取決於測量次數。4 次測量的 k=3.31,10 次測量的 k=2。

儲存移液器的最佳方法是什麼?

將移液器垂直存放,懸掛在架子或移液器架上。保持移液器清潔,無任何污染物。保持移液器吸頭架關閉。