良好的移液实践：通过培训和支持获得更好的结果

大多数生命科学应用都包括关键的液体处理步骤，在这些步骤中，移液量直接影响结果。如果移液不一致且不准确，那么时间、金钱和材料就会被浪费掉。准确的移液是可重复工作的基础，这对于生成有意义的数据至关重要。

提高移液精度的第一步是选择正确的移液器类型和适当的体积范围。对于量程，请选择适合您移液体积的最小容量移液器。例如，如果您要移液 2 μL，并且有 5 μL 移液器和 20 μL 移液器，则使用 5 μL 可以获得更高的准确度。 

查看这份关于移液器选择 的白皮书 ，了解哪种移液器最适合液体和其他特定因素： 选择合适的移液器

一旦您拥有了合适的仪器，请将您良好的移液技术付诸实践。制定例行测试计划，以最大限度地提高对结果的信任度，并且与任何精密仪器一样，确保制定定期的专家服务和校准方案。

快速测试移液器准确性的最简单方法可能是Rainin SmartCheck。在 mt.com/SmartCheck 了解更多信息

选择合适的 移液器 需要评估您的要求。首先，您要移液什么样的样品？它们是水性的吗？或者它们是粘性的、挥发性的、起泡的、腐蚀性的还是危险的？对于含水和近含水液体，最常见的空气置换移液器（也称为“空气间隙”移液器）是一个不错的选择。对于粘性、挥发性和其他不寻常的液体类型，外置活塞式移液器在准确性和安全性方面都是更好的选择。 

您将移液的体积是多少？从一个容器转移到另一个容器需要多少个样品？查看这份 关于移液器选择的白皮书 ，了解哪种移液器效果最佳，具体取决于液体和您具体情况的其他因素。

移液尽可能小的体积需要专门的仪器和技术。重复分液器可能是重复分配体积低至 100 nL 的最佳选择。另一种移液器也能用于少量分液。确保使用最小量程的移液器，以适应您要移液的体积。 

在非常低的量程下，移液技术对准确度和重现性的影响更大。浸入深度、移液角度和吸液速率对于控制很重要。Rainin 的 移液技术海报 可以提供帮助。

Rainin NanoRep 重复分配低至 100 nL 的等分试样。在这里了解更多信息： mt.com/NanoRep

在准确、可重复的多通道移液中，最重要的因素是移液器每个通道的密封完整性。这意味着每个吸头都完美地贴合每个通道，无漏气。不同的制造商以不同的方式实现这一目标，具有不同的人体工程学难易程度和密封一致性水平。Rainin的LTS LiteTouch系统移液器吸头从多通道加载和弹出所需的力最小，并且每次都能始终如一地密封。

单击此处查看Rainin的各种多通道移液器。

吸液时，将移液器尽可能接近垂直方向，避免偏离 Y 轴 20° 以上的任何角度。分液时，如果您要接触目标容器的壁以完全从吸头尖端排出所有液体，则可以超过 20° 角。

正向移液是标准的移液技术，也是水性样品的最佳选择。对于粘性和挥发性样品，反向移液可提供更高的准确性。

正向移液，请将活塞按钮向下推到第一个挡点，同时将移液器保持在液体外。然后，将吸头尖端浸入您正在使用的液体中 2-10 毫米深——不要更深。缓慢松开活塞按钮至完全伸展以吸出全部液体体积。要将移液器分液到目标容器中，请将移液器移入容器中，然后以均匀的速度按压活塞按钮，通过第一个挡点一直压到第二个挡点 -活塞按钮按压到底。在活塞完全按压的情况下，将移液器的吸头尖端轻轻拖动到容器壁上以“触壁”。这有助于完全分配全部液体体积。松开活塞按钮，弹出移液器吸头，装入新的移液器吸头，然后重复。

反向移液，请将活塞按钮一直向下按压，从第一个挡点向下推到第二个挡点 - 直到活塞按压到底。然后，将吸头尖端浸入液体中，缓慢均匀地释放活塞按钮以吸液。移动到接收容器并仅将活塞按钮按到第一个挡点以分配正确的体积。移液器吸头中将残留少量残留物。将移液器移到丢弃分配容器上，然后将活塞按钮继续向下按压至第二个挡点，也称为“吹液”挡点，以释放所有剩余的液体。 

松开柱塞，弹出移液器吸头，装入新的移液器吸头，然后重复。

空气置换式移液器可用于移液微粘稠液体，包括血液。为了达到最高精度，请使用上述反向移液技术。对于粘度更高的液体，如85%甘油或Triton X-100，外置活塞式移液器具有最佳的准确性和一致性。

乙醇等微挥发性液体可以使用上述反向移液技术用空气置换移液器移液。然而，外置活塞式移液器是挥发性液体的更好选择。 

如果使用空气置换式移液器，请在移液量之前至少预冲洗移液器吸头（吸液和分液）五次。这样可以平衡移液器内的空气，减慢液体的蒸发速度。挥发性液体的快速蒸发会使移液器内的空气膨胀，并迫使液体从吸头流出，而不会对活塞施加任何压力，这会降低准确的体积转移。

挥发性液体（如乙腈）通常最好使用外置活塞移液器处理。

是的，使用空气置换移液器移液会产生气溶胶。气溶胶会上升到移液器内部并污染内壁和活塞。当活塞在吸液过程中释放得太快时，更容易发生雾化，并且在分液过快的情况下也可能以相反的方向发生。 

为了尽量减少气溶胶，请缓慢均匀地吸液和分液。使用滤芯吸头。 

外置活塞式移液器使用注射器式吸头，可防止雾化。外置活塞移液器是移液危险液体和任何高粘度或挥发性液体的最佳选择。

极冷或极热的液体会改变空气置换移液器内的气压，导致移液不准确。 

外置活塞式移液器采用注射器式吸头，液体和活塞之间没有气体，不受液体温度的影响。外置活塞移液器可在非室温液体中提供准确的结果。

如果您必须使用空气置换式移液器移液非常热或非常冷的液体，请不要预润洗移液器吸头 - 这通常是获得最高精度的最佳实践。相反，应迅速吸液和分液，以尽量减少液体温度对移液器内部气隙的影响。

为避免移液时出现气泡和起泡，请勿将吸头浸入储液器中超过 10 毫米，并缓慢吸液。

反向移液提供了额外的保护，因为在吸液之前，您需要将活塞按钮完全压到第二个挡点，因此没有机会将空气注入液体样品中。有关反向移液的更多信息，请访问 此页面。 

外置活塞式移液器在与液体相互作用时不会产生气泡或泡沫，因为其注射器式吸头不会为液体提供与之相互作用的空气。

用湿布和异丙醇或 10% 漂白剂溶液等清洁剂擦拭移液器，对移液器进行消毒。避免清洁量程视窗。

高压灭菌可能是另一种选择，但请检查移液器的仪器规格。如果是高压灭菌的，是整个仪器高压灭菌还是仅移液端高压灭菌？  通常，只有液体端可以高压灭菌。

有关清洁移液器的更多信息，请获取 清洁移液器 海报。

校准是对移液器的系统误差（准确度）和随机误差（精确度）进行受控和记录的测量。在许多实验室环境中，移液器的性能必须定期进行测试，并在经认可机构认可的特定条件下依法记录。 

ISO认证的供应商在受控环境中校准移液器。结果安全地记录在校准证书上，为每台仪器提供可审计的性能历史记录。当需要调整时，ISO 认证的校准实验室会提供制造商推荐的零件和润滑剂的专家服务。 

Rainin 和梅特勒-托利多是全球最大的移液器服务机构，提供 邮寄和现场服务选项的快速周转服务。实验室已通过 ISO 17025 认证，程序遵循  ISO 8655和JJG646。 

移液器准确度（或现在称为真实度）是所有测量值（4-10 次测量值）的平均体积与设定体积之间的差值。 

精度是所执行的所有测量的标准偏差。每个读数与平均值相差多远？

移液器的不确定度是其整体准确性的定量术语。它是真实性（系统误差的度量）和精确度（随机误差的度量）的组合。 

不确定性的方程为： 

不确定度 = 系统误差 + 随机误差 * k. k（覆盖因子或 Z 分数）取决于测量次数。4 次测量的 k=3.31,10 次测量的 k=2。

将移液器垂直存放，悬挂在架子或移液器架上。保持移液器清洁，无任何污染物。保持移液器吸头架关闭。