Het betreffende molecuul kan worden uitgescheiden of kan zich ophopen in de cellen. Wanneer dit gebeurt, moeten de cellen eerst worden verstoord, waarbij afbraak moet worden voorkomen en de onzuiverheden worden gescheiden van het betreffende molecuul.

Centrifugatie en microfiltratie zijn optimale methoden om het molecuul van de cel te scheiden, zodat alleen de supernatant kan worden verzameld voor verdere zuivering.

Real-time meting van druk, debiet, deeltjes-ophoping, grootteverdeling, pH of troebelheid van cellen, kan feedbackcontrole bieden om  eventuele procesverstoring tot een minimum te beperken.

Virussen worden geïnactiveerd en niet-pathogeen gemaakt. In-line spectroscopie, troebelheid, pH-monitoring en -controle garanderen consistentie gedurende het gehele proces.

Het doelproduct wordt geïsoleerd en geconcentreerd door chromatografie.

Terwijl antilichamen worden opgevangen door affiniteitschromatografie met behulp van harsen met proteïne A, proteïne G of een andere selectief ontworpen methode, worden oligonucleotiden en niet-eiwitmoleculen vaak opgevangen door ionenuitwisselingschromatografie , polysachariden en complex glycaan door hydrofobe interactie of IMAC-chromatografie.

Veelvoorkomende metingen zijn onder meer druk, debiet, pH, Fourier Transform InfraRed spectroscopie (FTIR), UV-Vis en geleidbaarheid vóór de chromatografie om de variabele invoer te bewaken en informatie te verzamelen over de kwaliteit en prestaties. 

Met de zuiveringsstap worden de resterende onzuiverheden (zoals eiwitten, nucleïnezuren, endotoxinen, enz.) verwijderd door een opeenvolging van bewerkingen - klaring, extractie, chromatografie, tangential flow filtration (TFF) - terwijl het product zoveel mogelijk wordt behouden en verder wordt geconcentreerd met behulp van TFF via ultra/diafiltratie (UF/DF).

Het doel is om de zuiverheid te verhogen zonder opbrengst te verliezen. Het bewaken van debiet, druk, geleidbaarheid, pH, troebelheid en gewicht tijdens de voorbereiding en zuivering van de buffer zorgt voor betrouwbaarheid gedurende het gehele proces.

Virussen worden geïnactiveerd en niet-pathogeen gemaakt om de veiligheid van biotherapeutica te garanderen door de omgeving van de oplossing te veranderen (verlaging van de pH of toevoeging van oplosmiddelen/detergenten). Inline spectroscopie, troebelheid, pH- en ORP-monitoring en controle garanderen consistentie gedurende het gehele proces.

Met polijsten wordt de uiteindelijke zuiverheid bereikt.

Wetenschappers gebruiken grootte-uitsluitingschromatografie en tangential flow filtration (TFF) om onzuiverheden, zoals virale deeltjes, bacteriële pathogenen en endotoxinen, te verwijderen en de zuiveringsbuffer te vervangen door een formulering.

Terwijl FTIR-spectroscopie kan helpen bij het kwantificeren en specificeren van fractiecomponenten tijdens polijstchromatografie, is het bewaken van druk, debiet, geleidbaarheid, pH en troebelheid in alle processtappen, inclusief de buffervoorbereiding, een garantie voor productveiligheid en kwaliteit.