Het betreffende molecuul kan worden uitgescheiden of kan zich ophopen in de cellen. Wanneer dit gebeurt, moeten de cellen eerst worden verstoord, afbraak worden voorkomen en onzuiverheden worden gescheiden van het betreffende molecuul.

Centrifugatie en microfiltratie zijn optimale methoden om het molecuul van de cel te scheiden, en alleen het supernatans kan worden verzameld voor verdere zuivering.

Real-time meting van druk, debiet,  deeltjesophoping, grootteverdeling, pH of troebelheid van cellen die zowel in als uit filters worden gevoerd, kan feedbackcontrole bieden om procesverstoring tot een minimum te beperken.

Virussen worden geïnactiveerd en niet-pathogeen gemaakt. In-line spectroscopie, troebelheid, pH-monitoring en -controle garanderen consistentie gedurende het hele proces.

Het doelproduct wordt geïsoleerd en geconcentreerd door chromatografie.

Terwijl antilichamen worden vastgelegd door affiniteitschromatografie met behulp van harsen met proteïne A, proteïne G of andere selectief ontworpen methoden, worden oligonucleotiden en niet-eiwitmoleculen vaak vastgelegd door ionenuitwisselingschromatografie , polysachariden en complex glycaan door hydrofobe interactie of IMAC-chromatografie.

Veelvoorkomende metingen zijn onder meer druk, debiet, pH, Fouriertransformatie-infraroodspectroscopie (FTIR), UV-Vis en geleidbaarheid vóór de chromatografiekolom om variabele voedingsinvoer te bewaken en informatie te verstrekken over de kwaliteit en prestaties van de kolom. 

Met de zuiveringsstap worden de resterende onzuiverheden (zoals eiwitten, nucleïnezuren, endotoxinen, enz.) verwijderd door een opeenvolging van eenheidsbewerkingen - klaring, extractie, chromatografie, tangentiële stromingsfiltratie - terwijl het product zoveel mogelijk wordt behouden en verder wordt geconcentreerd met behulp van tangentiële stroomfiltratie (TFF) via ultra/diafiltratie (UF/DF).

Het doel is om de zuiverheid te verhogen zonder opbrengst te verliezen. Het bewaken van debiet, druk, geleidbaarheid, pH, troebelheid en vloeigrens tijdens de voorbereiding en zuivering van de buffer zorgt voor betrouwbaarheid gedurende het hele proces.

Virussen worden geïnactiveerd en niet-pathogeen gemaakt om de veiligheid van biotherapeutica te garanderen door de omgeving van de oplossing te veranderen (verlaging van de pH of toevoeging van oplosmiddelen/detergenten). Inline spectroscopie, troebelheid, pH- en ORP-monitoring en controle garanderen consistentie gedurende het hele proces.

Met polijsten wordt de uiteindelijke zuiverheid bereikt.

Wetenschappers gebruiken grootte-uitsluitingschromatografie en tangentiële stroomfiltratie om sporen van onzuiverheden te verwijderen - virale deeltjes, bacteriële pathogenen en endotoxinen - en de zuiveringsbuffer te vervangen door formulering één.

FTIR-spectroscopie kan helpen bij het kwantificeren en specificeren van fractiecomponenten tijdens polijstchromatografie, het bewaken van druk, stroming, geleidbaarheid, pH en troebelheid in alle bewerkingen van de polijsteenheid, inclusief de buffervoorbereiding, belofte voor productveiligheid en kwaliteit.