Repeteerpipetten

Door de kunststof zuiger in een wegwerp injectiespuit pipetpunt vast te klemmen, regelen repeteerpipetten nauwkeurig de opwaartse en neerwaartse bewegingen van de vloeistof in de pipetpunt. Het zuigeruiteinde maakt gedurende de volledige pipetteercyclus, van aspiratie en dosering, direct contact met het monster. Tijdens de aspiratie wordt de zuiger omhoog bewogen en wordt het monster in de pipetpunt van de spuit getrokken. De repeteerpipet duwt de zuiger vervolgens in gelijke stappen omlaag, aangeduid als ‘aliquots’, waarbij herhaaldelijk hetzelfde volume meerdere keren wordt gedoseerd.

Een repeteerpipet of repeterende pipet kan in bijna elk protocol worden gebruikt. Gebruik een repeteerpipet om replica's voor te bereiden, monsters te aliquoteren naar kleinere volumes voor langdurige opslag, analyses op te zetten door volumes van een reeks reagentia te doseren en zelfs om platen te wassen. Omdat ze injectiespuit pipetpunten met positieve vloeistofverplaatsing gebruiken, zijn repeteerpipetten uitermate geschikt voor het verwerken van uitdagende vloeistoffen (bv. viskeus, vluchtig en dicht).

Repeteerpipetten hebben een ingebouwde zuiger voor een volledige spoeling van elke wegwerp injectiespuit pipetpunt met positieve vloeistofverplaatsing. Daardoor zijn repeteerpipetten – ook wel repeterende pipetten genoemd – een uitstekende keuze voor het werken met uitdagende monsters, zoals viskeuze of vluchtige vloeistoffen.

Repeteerpipetten gebruiken speciale pipetpunten voor apparaten voor positieve vloeistofverplaatsing, die ‘injectiespuit pipetpunten’ worden genoemd. Ze worden ook wel 'capillairen' genoemd. Injectiespuit pipetpunten hebben een interne kunststof zuiger over de gehele lengte van de pipetpunt. Bij volume -0- blokkeert het uiteinde van de interne zuiger het open uiteinde van de pipetpunt.

Wanneer een gebruiker vloeistof aspireert, gaat het uiteinde van de zuiger omhoog en trekt die de vloeistof in de pipetpunt. In tegenstelling tot de meestgebruikte air displacement pipet, is er geen lucht tussen de zuiger en de vloeistof, en daarom staat positive displacement pipetteren bekend om zijn extreme nauwkeurigheid.

Hoewel positive displacement pipetten bij het pipetteren van vloeistoffen een hogere nauwkeurigheid bieden, is het belangrijk op te merken dat pipetpunten voor positieve vloeistofverplaatsing – met een ingebouwde kunststof zuiger in elke pipetpunt – vaak een hoger prijskaartje hebben dan gewone pipetpunten die op air displacement pipetten passen.

Een repeteerpipet kan worden gebruikt voor elke toepassing of workflow die testreplicatie vereist, of in gevallen waarin nauwkeurigheid en precisie bij monsters cruciaal zijn. Veel pipetgebruikers geven bijvoorbeeld de voorkeur aan repeteerpipetten voor het opzetten van PCR-reacties. Repeteerpipetten kunnen hetzelfde volume van het PCR-reactiemengsel in elke PCR-buis doseren.

Een andere veel voorkomende toepassing is het aliquoteren van kritische reagentia of monsters in recipiënten voor langdurige opslag, zoals serum van een patiënt dat moet worden ingevroren. Als een dergelijk monster simpelweg in één groot volume wordt ingevroren, kunnen onnodige ontdooicycli de integriteit van het monster/de temperatuurgevoelige biomarkers in gevaar brengen.

Tot slot zijn monsters met een hoge viscositeit of een hoge vluchtigheid meestal lastig te pipetteren met air displacement pipetten. Dat komt omdat de krachten die deze vloeistoffen op de luchtbel tussen de zuiger en de vloeistof in air displacement pipetten uitoefenen, leiden tot een slechte monster-tot-monster replicatie (slechte nauwkeurigheid en precisie). Repeteerpipetten verbeteren de nauwkeurigheid en precisie aanzienlijk in toepassingen of protocollen waarin uitdagende vloeistoffen worden verwerkt.