كيفية قياس الأس الهيدروجيني في العينات التي تحتوي على TRIS

1. النظام المرجعي كلوريد الفضة / الفضة القياسي

تحتاج أي عملية قياس للأس الهيدروجيني إلى اثنين من الأقطاب الكهربائية: قطب كهربائي مستشعر للزجاج وقطب كهربائي مرجعي. عادة، يطلق على مستشعرات الأس الهيدروجيني المستخدمة اليوم اسم مستشعرات 2 في 1، وهذا يعني وجود كلٍّ من قطب الاستشعار والقطب المرجعي في نفس المستشعر.

النظام المرجعي الأكثر استخدامًا في قياس الأس الهيدروجيني هو كلوريد الفضة/الفضة. يتألف النظام المرجعي كلوريد الفضة/الفضة التقليدي من سلك من الفضة مغلف بكلوريد الفضة وإلكتروليت مرجعي يتصل بالمحلول محل الاهتمام من خلال وصلة. لهذا التكوين، من المهم أن يكون الإلكتروليت المرجعي مشبعًا بكلوريد الفضة، بحيث لا ينضب كلوريد الفضة ولا يُنزع من السلك. للحفاظ على قدرة ثابتة، لا ينبغي استنفاد كلوريد الفضة، ويجب أن تسمح الوصلة بتدفق الإلكتروليت الغني بالأيونات في العينة.

2. صعوبة قياس الأس الهيدروجيني في العينات التي تحتوي على TRIS

لا يمكن استخدام مستشعرات كلوريد الفضة العادية لقياس عينات TRIS. تشتهر العديد من المركبات بارتباطها بأيونات الفضة لإنشاء جزيئات أو رواسب كبيرة. في الواقع، يعد كلوريد الفضة نفسه أحد هذه الرواسب، ويتميز بذوبانية محدودة في المحاليل المائية. ويتشكل مركب آخر بين أيونات الفضة وجزيئات TRIS، التي توجد عادة في المحاليل المعيارية البيولوجية.
تتدفق أيونات الفضة في محلول الإلكتروليت المرجعي إلى العينة ذات الاهتمام. إذا كانت هذه العينة تحتوي على محلول معياري TRIS، فسيجتمع هذان النوعان لتشكيل مركب مترسب مستقر. ولسوء الحظ، فإن النقطة التي يتشكل عندها هذا الراسب هي عادة نقطة التوصيل المرجعية، وهي عبارة عن فريت سيراميكي صغير مع مسام مجهرية. يؤدي تفاعل الترسيب هذا إلى انسداد المسام في الوصلة، مما يمنع تدفق الإلكتروليت. وبمجرد حدوث هذه العملية، يتم القضاء على السطح البيني بين محلول العينة والنظام المرجعي، ولا يمكن للنظام المرجعي أن يولد قدرة ثابتة. ويؤدي هذا إلى قراءات غير مستقرة وخاطئة للأس الهيدروجيني.