Rainin Good Pipetting Practice fra METTLER TOLEDO er en praktisk, videnskabeligt baseret tilgang til at hjælpe forskere med at forbedre og forbedre nøjagtigheden og effektiviteten af deres eksperimenter. Fra evaluering af arbejdsgange og valg af instrumenter til teknik, ergonomi og instrumentkvalificering hjælper GPP laboratorier med at forbedre eksperimentel reproducerbarhed med træning i væskehåndtering og tekniske ressourcer og supportressourcer.
GPP dækker mange pipetteringstekniske emner, der er relevante for biovidenskabelige forskere eller enhver, der bruger pipetter regelmæssigt:
Vores system af uddannelse og ressourcer hjælper bænkforskere med at forstå nuancerne i væskehåndtering og de værktøjer, teknikker og muligheder, der vil spare tid, reducere spild og opnå mere reproducerbare resultater.
Vi afholder korte og lange træningsforløb i dit laboratorium med hele dit team og kan endda måle hver brugers pipetteringsfærdigheder før og efter træning.
"Foredraget om det sikre pipetteringsområde gav os nye indsigter, som vi ikke kendte til før, og vi vil nu indarbejde disse i vores daglige opgaver."
"I starten var deltagerne skeptiske overfor, om en praktisk del var nødvendig. Men set i bakspejlet kunne der afdækkes specifikke mangler i pipettering, som ikke var kendt før, hvilket gør feedbacken endnu mere positiv."
"GPP-seminaret hjælper os med at uddanne vores medarbejdere og holde dem ajour med den nyeste pipetteringsteknologi."
"Deltageren ønskede at finde ud af, hvordan man opretholder ensartede resultater på tværs af deres slutbrugergruppe ved at pipettere en løsning med suspenderede celler. Det var afgørende at holde cellerne grundigt blandet i opløsningen, før de blev overført. Efter mange diskussioner var vi alle enige om, at det var bedst at bruge spidser med lav retention for at reducere prøveretention og blande opløsningen et par gange, før vi tog den arbejdende afpipettering fra røret til pladen."
"De nye medarbejdere, der kom ind i virksomheden, var blevet undervist på forskellige niveauer i det akademiske laboratorium, så de havde alle forskellige niveauer af pipetteringserfaring. Dette seminar var gavnligt."
Tillykke med at have gennemført et af vores GPP-seminarer. Det er hurtigt at bestille dit færdiggørelsesbevis. Du skal blot klikke på dette link og indtaste din seminarkode.
Når du bestiller dit gratis færdiggørelsescertifikat, planter vi et træ gennem vores partnere hos One Tree Planted.
.png/_jcr_content/renditions/cq5dam.web.1280.1280.png "god pipetteringspraksis fra Rainin")
Udstrækning i løbet af dagen hjælper med at forhindre træthed og smerter, der kan påvirke eksperimentelle resultater. Få plakaten, og forbedr pipetteringsergonomien i dit laboratorium. Læs mere
Vores Bench Posture-plakat dækker alle emner om den rigtige kropsholdning for at forhindre kroniske muskel- og skeletlidelser for dem, der arbejder i laboratoriet. Læs mere
Specifikke teknikker til dekontaminering af pipetter med bestemte rengøringsmidler til forskellige typer af prøver. Læs mere
Pipettering af tyktflydende, højt damptryk, skumdannelse og andre typer udfordrende væsker, som inkluderer instruktioner til omvendt pipettering. Læs mere
Den måde, du pipetterer på, har direkte indflydelse på dine eksperimenters succes og repeterbarhed. Brug disse gode tips til pipetteringsøvelser til at forbedre din pipetteringsnøjagtighed. Læs mere
Denne plakat illustrerer hurtige håndstræk for at øge dit fingerbevægelsesområde og styrke din pipetterende tommelfinger. Læs mere
Quick Check-plakaten forklarer i ti trin, der er nemme at følge, hvordan alle i laboratoriet kan kontrollere deres pipetters ydeevne. Læs mere
Med god pipetteringspraksis tilbyder METTLER TOLEDO en bred vifte af uddannelse og ressourcer til at hjælpe laboratorieforskere, laboratorieledere og kvalitets- og sikkerhedsprofessionelle med at opnå mere pålidelige og repeterbare eksperimentelle resultater, samtidig med at deres organisations samlede risiko sænkes.
Evaluering og udvælgelse
Minimer dine risici, og forbedr robustheden af dine pipetteringsarbejdsgange ved hjælp af vores risikobaserede tilgang til evaluering af protokoller og valg af de rigtige instrumenter og forbrugsstoffer.
Teknik træning
Hjælp teams med at forbedre deres færdigheder og reproducerbarheden af deres eksperimenter ved at fokusere på, hvordan brugerne påvirker pipetteringsnøjagtighed og eksperimentelle resultater.
Ergonomi
God bordergonomi forbedrer teamets sundhed og velvære, samtidig med at den forbedrer eksperimentel reproducerbarhed og reducerer risikoen for gentagne belastningsskader.
Kalibrering og rutinemæssig drift
Kvalitetssikringsbehov varierer meget på tværs af laboratorier og organisationer. GPP kan hjælpe dig med at finde den rette balance mellem kvalitet, sikkerhed, overholdelse og omkostninger.
Dette whitepaper diskuterer, hvordan en vellykket væskehåndteringsstrategi er en kritisk succesfaktor for små og nystartede life science-virksomheder, der forsøger at opfylde time-to-market-mål. Læs mere
Vores Rainin-guide til pipettering hjælper dig med at opnå nøjagtige, reproducerbare resultater gennem informerede valg af pipette og spidsvalg og korrekt teknik. Læs mere
.jpg/_jcr_content/renditions/cq5dam.web.1280.1280.jpeg "Hvidbog om pipetteringsergonomi")
Højere pipetteringskræfter og lange timers pipettering er forbundet med udvikling af gentagne belastningsskader (RSI'er). Følgende anbefalinger fundet i denne hvidbog om pipetteringsergonomi vil hjælpe forskere med at minimere deres chance for at udvikle disse tilstande. Læs mere
Improve pipetting accuracy by understanding basic concepts behind pipetting errors and uncertainty. Learn how pipetting accuracy can improve pipetting results. Læs mere
Dette white paper giver en oversigt over de mest almindelige typer pipetter og giver værdifulde tips til, hvordan du får mest muligt ud af din pipette, afhængigt af din arbejdsgang. Læs mere
Pipettekalibrering og -teknikker er afgørende for at holde pipetterne velholdte og maksimere ydeevnen i laboratoriet. Læs mere
Denne artikel er skrevet til alle, der har en rolle i at skabe et sikkert laboratorium – medarbejdere, ledere og andre strategiske partnere. Læs mere
.jpg/_jcr_content/renditions/cq5dam.web.1280.1280.jpeg "God pipetteringspraksis")
Væskehåndtering til celledyrkning, et hvidt papir, som forklarer de forskellige typer celler, der kan dyrkes, og de forskningsområder og værktøjer, der er mest hensigtsmæssige i forbindelse med den enkelte type. Læs mere
De fleste forskere rapporterer, at de ikke har formået at reproducere eksperimenter. Download vores nye hvidbog for at få mere at vide om, hvad der driver den, og tips til at sikre, at den ikke skyldes unøjagtig væskehåndtering. Læs mere
Nøjagtig pipettering kræver beherskelse af nogle få grundlæggende teknikker. Disse omfatter:
De fleste life science-applikationer omfatter kritiske væskehåndteringstrin, hvor pipetteret volumen direkte påvirker resultatet. Hvis pipettering ikke er konsekvent og nøjagtig, kan tid, penge og materiale gå til spilde. Nøjagtig pipettering danner grundlaget for reproducerbart arbejde, hvilket er afgørende for at generere meningsfulde data.
Det første skridt mod at forbedre pipetteringsnøjagtigheden er at vælge den rigtige type pipette og det korrekte volumenområde. For størrelse skal du vælge den pipette med laveste volumen, der passer til den volumen, du pipetterer. Hvis du f.eks. pipetterer 2 μL og har en 5 μL pipette og en 20 μL pipette, får du bedre nøjagtighed ved at bruge 5 μL.
Se dette white paper om valg af pipetter for at forstå, hvilken pipette der fungerer bedst for væsken og andre faktorer, der er unikke for din situation: Valg af den rigtige pipette
Når du har det rigtige instrument, skal du bruge din gode pipetteringsteknik i praksis. Opsæt en rutinemæssig testplan for at maksimere tilliden til dine resultater over tid, og som med ethvert præcisionsinstrument skal du sørge for at indføre et regelmæssigt service- og kalibreringsprogram med eksperter.
Den nemmeste måde at hurtigt teste en pipettes nøjagtighed på kan være Rainin SmartCheck. Få mere at vide på mt.com/SmartCheck
At vælge den rigtige pipette indebærer en evaluering af dine behov. For det første, hvilken slags prøver pipetterer du? Er de vandige? Eller er de tyktflydende, flygtige, skummende, ætsende eller farlige? Til vandige og næsten vandige væsker er de mest almindelige luftfortrængningspipetter (også kaldet "luftpude"-pipetter) et godt valg. For tyktflydende, flygtige og andre usædvanlige væsketyper ville en pipette med positiv forskydning være et bedre valg for både nøjagtighed og sikkerhed.
Hvilken volumen vil du pipettere? Hvor mange prøver skal du overføre fra et fartøj til et andet? Se dette white paper om valg af pipetter for at forstå, hvilken pipette der fungerer bedst afhængigt af væsken og andre faktorer, der er unikke for din situation.
Pipettering af de mindst mulige mængder involverer specialiserede instrumenter og teknikker. En repeater-pipette kan være dit bedste valg til at gentage mængder ned til 100 nL. En anden pipette kan også fungere til blot nogle få dispenser. Sørg for at bruge den mindste pipette, der passer til den volumen, du ønsker at pipette.
Ved meget lave volumener har pipetteringsteknikken en forholdsmæssigt større indvirkning på nøjagtighed og reproducerbarhed. Nedsænkningsdybde, pipetteringsvinkel og aspirationshastighed er vigtige at kontrollere. Plakaten med pipetteringsteknikker fra Rainin kan hjælpe.
Rainin NanoRep dispenserer gentagne gange alikvoter ned til 100 nL. Få mere at vide her: mt.com/NanoRep
Den vigtigste faktor i nøjagtig, reproducerbar flerkanalspipettering er integriteten af forseglingen for hver kanal i pipetten. Det betyder, at hver spids passer perfekt på hver aksel uden luftlækage. Forskellige producenter opnår dette på forskellige måder, med varierende ergonomisk lethed og tætningskonsistensniveauer. LTS LiteTouch System-pipettespidser fra Rainin kræver mindst kraft for at indlæse og skubbe ud fra flere kanaler, og de forsegler konsekvent hver gang.
Klik her for at se Rainins brede udvalg af flerkanalspipetter.
Når du aspirerer, skal du holde en pipette så tæt på lodret som muligt, og undgå enhver vinkel, der er større end 20° fra Y-aksen. Når du dispenserer, hvis du rører ved væggen af målbeholderen for helt at trække al væske helt ud af spidsen, er det OK at overskride vinklen på 20°.
Fremadrettet pipettering er standardpipetteringsteknikken og det bedste valg til vandige prøver. For viskøse og flygtige prøver giver omvendt pipettering bedre nøjagtighed.
For at skubbe pipetten fremad skal du skubbe stemplet ned til det første stop, mens du holder pipetten uden for væsken. Nedsænk derefter spidsen 2-10 mm dybt ned i den væske, du arbejder med – ikke dybere. Slip stemplet langsomt til fuld forlængelse for at aspirere hele væskevolumenet. For at dispensere i din målbeholder skal du flytte pipetten ind i beholderen og derefter trykke stemplet med en jævn hastighed gennem det første stop hele vejen til det andet stop – så langt stemplet rækker. Når stemplet er trykket helt ned, skal du let trække spidsen af pipetten op ad beholderens væg for at "røre ved". Dette hjælper med at dispensere det fulde væskevolumen fuldstændigt. Slip stemplet, skub pipettespidsen ud, isæt en ny pipettespids, og gentag.
For at vende pipetten skal du skubbe stemplet helt ned gennem det første stop til det andet stop – så langt som stemplet rækker. Nedsænk derefter spidsen i væske og slip langsomt og jævnt stemplet for at aspirere. Flyt til modtagerbeholderen, og tryk KUN PÅ STEMPLET til første stop for at dispensere den korrekte volumen. Der vil være et lille restvolumen tilbage i pipettespidsen. Flyt pipetten over en kasseringsbeholder, og tryk stemplet resten af vejen ned til det andet stop, også kaldet "blowout"-stop, for at frigive eventuel resterende væske.
Slip stemplet, skub pipettespidsen ud, isæt en ny pipettespids, og gentag.
En luftfortrængningspipette kan bruges til at pipettere let tyktflydende væsker, herunder blod. For at opnå maksimal nøjagtighed skal du bruge den omvendte pipetteringsteknik beskrevet ovenfor. Til mere tyktflydende væsker, såsom 85 % glycerol eller Triton X-100, giver en pipette med positiv forskydning den bedste nøjagtighed og konsistens.
Let flygtige væsker såsom ethanol kan pipetteres med en luftfortrængningspipette ved hjælp af ovennævnte omvendte pipetteringsteknik. Pipetter med positiv forskydning er dog et bedre valg til flygtige væsker.
Hvis du bruger en luftfortrængningspipette, skal du forskylle pipettespidsen (aspirere og dispensere) mindst fem gange, før du pipetterer din lydstyrke. Dette afbalancerer luften inde i pipetten og sænker væskens fordampningshastighed. Hurtig fordampning af flygtige væsker udvider luften inde i en pipette og tvinger væske ud af spidsen uden at der lægges tryk på stemplet, og dette mindsker nøjagtig volumentilførsel.
Flygtige væsker såsom acetonitril håndteres generelt bedre med en positiv fortrængningspipette.
Ja, pipettering med luftfortrængningspipetter kan skabe aerosoler. Aerosoler kan stige ind i pipettens indre og forurene de indvendige vægge og stemplet. Aerosolisering sker lettere, når stemplet frigives for hurtigt under aspiration og kan også forekomme i den modsatte retning uden for pipetten med for hurtig dispensering.
For at minimere aerosoler skal du aspirere og dispensere langsomt og jævnt. Brug filtrerede spidser.
Pipetter med positiv forskydning bruger sprøjtestilspidser, der forhindrer aerosolisering. En pipette med positiv forskydning er det bedste valg til pipettering af farlige væsker og enhver væske med forhøjet viskositet eller flygtighed.
Meget kolde eller varme væsker ændrer lufttrykket i luftfortrængningspipetter, hvilket fører til unøjagtig pipettering.
Pipetter med positiv forskydning med sprøjtespidser, der ikke har nogen luftlomme mellem væske og stempel, påvirkes ikke af forskellige temperaturer på væsker. Pipetter med positiv forskydning giver nøjagtige resultater med væsker uden stuetemperatur.
Hvis du skal pipettere en meget varm eller kold væske med en luftfortrængningspipette, skal du ikke skylle pipettespidsen på forhånd – dette er typisk den bedste praksis for den højeste nøjagtighed. I stedet skal du aspirere og dispensere hurtigt for at minimere effekten af væskens temperatur på pipettens indvendige luftspalte.
For at undgå bobler og skumdannelse ved pipettering må spidsen ikke nedsænkes mere end 10 mm i væskebeholderen, og aspirere langsomt.
Omvendt pipettering giver ekstra beskyttelse, fordi du, før aspiration, trykker stemplet helt til 2. stop, så der ikke er nogen chance for at sprøjte luft ind i væskeprøven. Du kan få mere at vide om omvendt pipettering på denne side.
En pipette med positiv forskydning skaber ikke bobler eller skum, når den interagerer med væske, fordi dens sprøjtelignende spids ikke præsenterer luft, som væsken kan interagere med.
Dekontaminer en pipette ved at tørre den af med en våd klud og et rengøringsmiddel som isopropanol eller en 10% blegemiddelopløsning. Undgå mikrometerets klare plastvindue.
Autoklavering kan være en anden mulighed, men tjek din pipettes instrumentspecifikationer. Hvis det er autoklaverbart, er hele instrumentet autoklaveret eller kun den flydende ende? Ofte er det kun den flydende ende, der kan autoklaveres.
Du kan få mere at vide om rengøring af en pipette på plakaten Rengøring af en pipette .
Kalibrering er den kontrollerede og dokumenterede måling af en pipettes systematiske fejlrate (nøjagtighed) og tilfældige fejlrate (præcision). I mange laboratoriemiljøer skal pipettens ydeevne regelmæssigt testes og dokumenteres ved lov under specifikke betingelser, der er certificeret af et akkrediteret organ.
ISO-certificerede udbydere kalibrerer pipetter i en kontrolleret indstilling. Resultaterne dokumenteres sikkert på et kalibreringscertifikat, hvilket tilføjer en revisionsklar ydeevnehistorik for hvert instrument. Når justeringer er nødvendige, yder ISO-certificerede kalibreringslaboratorier ekspertservice med producentanbefalede dele og smøremidler.
Rainin og METTLER TOLEDO er verdens største pipetteserviceorganisation med hurtig ekspeditionstid fra post-ind- og onsite-servicemuligheder. Servicelaboratorier er ISO 17025-certificerede, og procedurerne følger 2022-opdateringen til ISO 8655.
Pipettenøjagtighed – eller ægthed, som det hedder nu – er forskellen mellem det gennemsnitlige volumen af alle målinger (4-10 målinger) og det indstillede volumen.
Præcision er standardafvigelsen for alle udførte målinger. Hvor langt fra hinanden er de andre?
En pipettes usikkerhed er den kvantitative betegnelse for dens samlede nøjagtighed. Det er en kombination af sandhed (et mål for systematiske fejl) og præcision (et mål for tilfældige fejl).
Ligningen for usikkerhed er:
Usikkerhed = Systematisk fejl + Tilfældig fejl * k. k (dækningsfaktor eller Z-score) afhænger af antallet af målinger. K=3,31 for fire målinger og 2 for ti målinger.
Opbevar pipetter lodret, hængende fra en hylde eller et pipettestativ. Hold pipetter rene og fri for forurenende stoffer. Hold pipettespidsstativerne lukkede.