Rainin Good Pipetting Practice fra METTLER TOLEDO er en praktisk, videnskabeligt baseret tilgang til at hjælpe forskere med at forbedre og forbedre nøjagtigheden og effektiviteten af deres eksperimenter. Fra evaluering af arbejdsgange og instrumentvalg til teknik, ergonomi og instrumentkvalificering hjælper GPP laboratorier med at forbedre eksperimentel reproducerbarhed med uddannelse i væskehåndtering og tekniske ressourcer og supportressourcer.
GPP dækker mange emner inden for pipetteringsteknik, der er relevante for biovidenskabsforskere eller enhver, der bruger pipetter regelmæssigt:
Vores uddannelsessystem og ressourcer hjælper bænkforskere med at forstå nuancerne i væskehåndtering og de værktøjer, teknikker og muligheder, der sparer tid, reducerer spild og opnår mere reproducerbare resultater.
Vi afholder kurser i kort og langt format i dit laboratorium med hele dit team og kan endda måle hver brugers pipetteringsfærdigheder før og efter træning.
"Foredraget om det sikre pipetteringsområde gav os nye indsigter, som vi ikke var bekendt med før, og vi ønsker nu at indarbejde disse i vores daglige opgaver."
"I starten var deltagerne skeptiske over for, om en praktisk del var nødvendig. Set i bakspejlet kunne der stadig afdækkes specifikke mangler i pipettering, som ikke var kendt før, hvilket gør feedbacken endnu mere positiv."
"GPP-seminaret hjælper os med at uddanne vores medarbejdere og holde dem opdateret med den nyeste pipetteringsteknologi."
"Deltageren ønskede at bestemme, hvordan man opretholder ensartede resultater på tværs af deres slutbrugergruppe ved at pipettere en opløsning med suspenderede celler. Det var afgørende at holde cellerne grundigt blandet i opløsningen, før de blev overført. Efter megen diskussion var vi alle enige om, at det var bedst at bruge tip med lav retentionsevne til at reducere prøveretention og blande opløsningen et par gange, før vi tog arbejdsalikvoten fra røret til pladen.
"De nye medarbejdere, der kom ind i virksomheden, var blevet undervist på forskellige niveauer i det akademiske laboratorium, så de havde alle forskellige niveauer af pipetteringserfaring. Dette seminar var gavnligt."
Tillykke med gennemførelsen af et af vores GPP-seminarer. Det er hurtigt at bestille dit færdiggørelsescertifikat. Du skal blot klikke på dette link og indtaste din seminarkode.
Når du bestiller dit gratis færdiggørelsescertifikat, planter vi et træ gennem vores partnere hos One Tree Planted.
.png/_jcr_content/renditions/cq5dam.web.1280.1280.png "god pipetteringspraksis fra Rainin")
Strækning hele dagen hjælper med at forhindre træthed og smerter, der kan påvirke eksperimentelle resultater. Få plakaten, og få bedre ergonomi ved pipettering i dit laboratorium. Læs mere
Vores Bench Posture plakat dækker alle emner om den rigtige kropsholdning til forebyggelse af kroniske muskel-skelet-lidelser for dem, der arbejder i laboratoriet. Læs mere
Specifikke teknikker til dekontaminering af pipetter med bestemte rengøringsmidler til forskellige typer af prøver. Læs mere
Afpipettering trygt tyktflydende, højt damptryk, skumdannelse og andre typer udfordrende væsker, som omfatter instruktioner til omvendt pipettering. Læs mere
Den måde, du pipetterer på, påvirker direkte dine eksperimenters succes og repeterbarhed. Brug disse gode tip til pipettering til at forbedre din pipetteringsnøjagtighed. Læs mere
Denne plakat illustrerer hurtige håndstræk for at øge dit fingerbevægelsesområde og styrke din pipetterende tommelfinger. Læs mere
Quick Check-plakaten forklarer i ti nemme trin, hvordan alle i laboratoriet kan kontrollere pipetternes ydeevne. Læs mere
Med Good Pipetting Practice tilbyder METTLER TOLEDO en bred vifte af uddannelse og ressourcer, der kan hjælpe prøvebænkforskere, laboratorieledere og kvalitets- og sikkerhedsfagfolk med at opnå mere pålidelige og repeterbare eksperimentelle resultater, samtidig med at deres organisations samlede risiko reduceres.
Evaluering og udvælgelse
Minimer dine risici, og øg robustheden af dine pipetteringsarbejdsgange ved hjælp af vores risikobaserede tilgang til evaluering af protokoller og valg af de rigtige instrumenter og forbrugsstoffer.
Teknik træning
Hjælp teams med at forbedre deres færdigheder og reproducerbarheden af deres eksperimenter ved at fokusere på, hvordan brugerne påvirker pipetteringsnøjagtighed og eksperimentelle resultater.
Ergonomi
God bænkergonomi forbedrer teamets sundhed og trivsel, samtidig med at eksperimentel reproducerbarhed forbedres og potentialet for gentagne belastningsskader reduceres.
Kalibrering og rutinedrift
Kvalitetssikringsbehovene varierer meget på tværs af laboratorier og organisationer. GPP kan hjælpe dig med at finde den rette balance mellem kvalitet, sikkerhed, overholdelse og omkostninger.
Dette whitepaper diskuterer, hvordan en vellykket væskehåndteringsstrategi er en kritisk succesfaktor for små og nystartede life science-virksomheder, der forsøger at opfylde time-to-market-mål. Læs mere
Vores Rainin-guide til pipettering hjælper dig med at opnå nøjagtige, reproducerbare resultater gennem informerede valg af pipetter og spidser og korrekt teknik. Læs mere
.jpg/_jcr_content/renditions/cq5dam.web.1280.1280.jpeg "Hvidbog om ergonomisk pipettering")
Højere pipetteringskræfter og mange timers pipettering er forbundet med udvikling af gentagne belastningsskader (RSI'er). Følgende anbefalinger, der findes i denne hvidbog om ergonomisk pipettering, vil hjælpe forskere med at minimere deres chance for at udvikle disse tilstande. Læs mere
Improve pipetting accuracy by understanding basic concepts behind pipetting errors and uncertainty. Learn how pipetting accuracy can improve pipetting results. Læs mere
Dette white paper giver en oversigt over de mest almindelige typer pipetter og giver værdifulde tips til, hvordan du får mest muligt ud af din pipette, afhængigt af din arbejdsgang. Læs mere
Pipettekalibrering og -teknikker er afgørende for at holde pipetterne velholdte og maksimere ydeevnen i laboratoriet. Læs mere
Dette papir er skrevet til alle, der har en rolle i at skabe et sikkert laboratorium - medarbejdere, ledere og andre strategiske partnere. Læs mere
.jpg/_jcr_content/renditions/cq5dam.web.1280.1280.jpeg "Good Pipetting Practice")
Væskehåndtering til celledyrkning, et hvidt papir, som forklarer de forskellige typer celler, der kan dyrkes, og de forskningsområder og værktøjer, der er mest hensigtsmæssige i forbindelse med den enkelte type. Læs mere
De fleste forskere rapporterer, at de har undladt at reproducere eksperimenter. Download vores nye white paper for at få mere at vide om, hvad der driver den, og tips til at sikre, at den ikke skyldes unøjagtig væskehåndtering. Læs mere
Væskehåndtering til celledyrkning, et hvidt papir, som forklarer de forskellige typer celler, der kan dyrkes, og de forskningsområder og værktøjer, der er mest hensigtsmæssige i forbindelse med den enkelte type. Læs mere
Nøjagtig pipettering kræver beherskelse af nogle få grundlæggende teknikker. Det drejer sig bl.a. om:
De fleste life science-applikationer omfatter kritiske væskehåndteringstrin, hvor pipettet volumen direkte påvirker resultatet. Hvis pipettering ikke er konsistent og nøjagtig, kan tid, penge og materialer gå til spilde. Nøjagtig pipettering danner grundlaget for reproducerbart arbejde, hvilket er afgørende for at generere meningsfulde data.
Det første skridt i retning af at forbedre pipetteringsnøjagtigheden er at vælge den rigtige type pipette og det korrekte volumenområde. Som størrelse skal du vælge den pipette med den laveste volumen, der passer til den volumen, du pipetterer. Hvis du f.eks. pipetterer 2 μL og har en 5 μL pipette og en 20 μL pipette, får du bedre nøjagtighed ved hjælp af 5 μL.
Se denne hvidbog om valg af pipette for at forstå, hvilken pipette der fungerer bedst for væsken og andre faktorer, der er unikke for din situation: Valg af den rigtige pipette
Når du har det rigtige instrument, skal du omsætte din gode pipetteringsteknik i praksis. Opret en rutinemæssig testplan for at maksimere tilliden til dine resultater over tid, og som med ethvert præcisionsinstrument skal du sørge for at indføre en regelmæssig, ekspertservice og kalibreringsregime.
Den nemmeste måde hurtigt at teste en pipettes nøjagtighed på kan være Rainin SmartCheck. Få mere at vide på mt.com/SmartCheck
At vælge den rigtige pipette indebærer evaluering af dine krav. For det første, hvilken slags prøver pipetterer du? Er de vandige? Eller er de tyktflydende, flygtige, skummende, ætsende eller farlige? Til vandige og næsten vandige væsker er de mest almindelige luftfortrængningspipetter (også kaldet "luftpude"-pipetter) et godt valg. For tyktflydende, flygtige og andre usædvanlige væsketyper ville en positiv fortrængningspipette være et bedre valg for både nøjagtighed og sikkerhed.
Hvilken volumen vil du pipettere? Hvor mange prøver skal du overføre fra et fartøj til et andet? Se denne hvidbog om valg af pipette for at forstå, hvilken pipette der fungerer bedst afhængigt af væsken og andre faktorer, der er unikke for din situation.
Pipettering af de mindst mulige volumener involverer specialiserede instrumenter og teknikker. En repeaterpipette kan være dit bedste valg til at gentage dispenseringsvolumener ned til 100 nL. En anden pipette kan også fungere til nogle få dispenseringer. Sørg for at bruge den mindste pipettestørrelse, der passer til den volumen, du ønsker at pipette.
Ved meget lave volumener har pipetteringsteknikken forholdsmæssigt større indflydelse på nøjagtighed og reproducerbarhed. Nedsænkningsdybde, pipetteringsvinkel og aspirationshastighed er vigtige at kontrollere. Plakaten Pipetting Techniques fra Rainin kan hjælpe.
Rainin NanoRep gentager-dispenserer alikvoter ned til 100 nL. Læs mere her: mt.com/NanoRep
Den vigtigste faktor for nøjagtig, reproducerbar multikanalpipettering er tætningens integritet for hver kanal i pipetten. Det betyder, at hver spids passer perfekt på hver aksel uden luftlækage. Forskellige producenter opnår dette på forskellige måder med varierende ergonomisk lethed og tætningskonsistensniveauer. LTS LiteTouch System-pipettespidser fra Rainin kræver mindst mulig kraft for at i- og skubbes ud fra multikanalen, og de forsegler konsekvent hver gang.
Klik her for at se Rainins brede udvalg af multikanalpipetter.
Når du aspirerer, skal du holde en pipette så tæt på lodret som muligt, og undgå enhver vinkel, der er større end 20° fra Y-aksen. Hvis du rører ved målbeholderens væg for at trække al væske helt ud af spidsen, er det OK at overskride 20°-vinklen, når du dispenserer.
Fremadrettet pipettering er standardpipetteringsteknikken og det bedste valg til vandige prøver. For tyktflydende og flygtige prøver giver omvendt pipettering bedre nøjagtighed.
For at skubbe pipetten fremad skal du skubbe stemplet ned til det første stop, mens pipetten holdes uden for væsken. Nedsænk derefter spidsen 2-10 mm dybt ned i den væske, du arbejder med – ikke dybere. Slip langsomt stemplet til fuld forlængelse for at opsuge hele væskevolumenet. For at dispensere i målbeholderen skal pipetten føres ind i beholderen og derefter trykke stemplet med en jævn hastighed gennem det første stop hele vejen til det andet stop – så langt stemplet rækker. Når stemplet er trykket helt ned, trækkes pipettens spids let op ad beholderens væg for at "røre af". Dette hjælper med at dispensere det fulde væskevolumen fuldstændigt. Slip stemplet, skub pipettespidsen ud, ilæg en ny pipettespids, og gentag.
For at vende pipetten skal du skubbe stemplet helt ned gennem det første stop til det andet stop – så langt stemplet rækker. Nedsænk derefter spidsen i væske, og slip langsomt og jævnt stemplet for at aspirere. Gå hen til modtagerbeholderen, og tryk kun på stemplet TIL FØRSTE STOP for at dispensere den korrekte lydstyrke. Et lille restvolumen forbliver i pipettespidsen. Bevæg pipetten hen over en kasseringsbeholder, og tryk stemplet resten af vejen ned til det andet stop, også kaldet "blowout"-stoppet, for at frigive eventuel resterende væske.
Slip stemplet, skub pipettespidsen ud, ilæg en ny pipettespids, og gentag.
En luftfortrængningspipette kan bruges til at pipette let tyktflydende væsker, herunder blod. For at opnå maksimal nøjagtighed skal du bruge den ovenfor beskrevne reverse pipetteringsteknik. For mere tyktflydende væsker, såsom 85% glycerol eller Triton X-100, giver en positiv fortrængningspipette den bedste nøjagtighed og konsistens.
Let flygtige væsker såsom ethanol kan pipetteres med en luftfortrængningspipette ved hjælp af ovennævnte reverse pipetteringsteknik. Pipetter med positiv fortrængning er dog et bedre valg til flygtige væsker.
Hvis du bruger en luftfortrængningspipette, skal du forskylle pipettespidsen (aspirere og dispensere) mindst fem gange, før du pipetterer din volumen. Dette ligevægter luften inde i pipetten og bremser væskens fordampningshastighed. Hurtig fordampning af flygtige væsker udvider luften inde i en pipette og tvinger væske fra spidsen, uden at der lægges tryk på stemplet, og dette mindsker den nøjagtige volumentilførsel.
Flygtige væsker såsom acetonitril håndteres generelt bedre med en positiv fortrængningspipette.
Ja, pipettering med luftfortrængningspipetter kan skabe aerosoler. Aerosoler kan stige ind i pipettens indre og forurene indvendige vægge og stempel. Aerosolisering sker lettere, når stemplet frigives for hurtigt under aspiration, og kan også forekomme i modsat retning uden for pipetten ved alt for hurtig dispensering.
For at minimere aerosoler skal du aspirere og dispensere langsomt og jævnt. Brug filtrerede tip.
Positive fortrængningspipetter bruger sprøjtelignende tip, der forhindrer aerosolisering. En positiv fortrængningspipette er det bedste valg til pipettering af farlige væsker og enhver væske med forhøjet viskositet eller flygtighed.
Meget kolde eller varme væsker ændrer lufttrykket i luftfortrængningspipetterne, hvilket fører til unøjagtig pipettering.
Positive fortrængningspipetter med sprøjtespidser, der ikke har nogen luftlomme mellem væske og stempel, påvirkes ikke af forskellige væsketemperaturer. Positive fortrængningspipetter giver nøjagtige resultater med væsker uden stuetemperatur.
Hvis du skal pipette en meget varm eller kold væske med en luftfortrængningspipette, skal du ikke skylle pipettespidsen på forhånd – dette er typisk den bedste praksis for at opnå den højeste nøjagtighed. I stedet skal du aspirere og dispensere hurtigt for at minimere virkningen af væskens temperatur på pipettens indvendige luftspalte.
For at undgå bobler og skumdannelse ved pipettering må du ikke nedsænke spidsen mere end 10 mm i væskebeholderen og aspirere langsomt.
Omvendt pipettering giver ekstra beskyttelse, fordi du inden aspirering trykker stemplet helt ned til 2. stop, så der ikke er nogen chance for at injicere luft i væskeprøven. Du kan finde flere oplysninger om reverse pipettering på denne side.
En pipette med positiv fortrængning skaber ikke bobler eller skum, når den interagerer med væske, fordi dens sprøjtespids ikke giver luft, som væsken kan interagere med.
Dekontaminer en pipette ved at tørre den af med en våd klud og et rengøringsmiddel som isopropanol eller en 10% blegemiddelopløsning. Undgå mikrometerets klare plastvindue.
Autoklavering kan være en anden mulighed, men tjek pipettens instrumentspecifikationer. Hvis det er autoklaverbart, er hele instrumentet autoklaveret eller kun den flydende ende? Ofte kan kun den flydende ende autoklaveres.
Du kan få mere at vide om rengøring af en pipette ved at få plakaten Rengøring af en pipette .
Kalibrering er den kontrollerede og dokumenterede måling af en pipettes systematiske fejlrate (nøjagtighed) og tilfældige fejlrate (præcision). I mange laboratoriemiljøer skal pipetteydelsen regelmæssigt testes og dokumenteres ved lov under særlige betingelser, der er certificeret af et akkrediteret organ.
ISO-certificerede udbydere kalibrerer pipetter i kontrollerede omgivelser. Resultaterne dokumenteres sikkert på et kalibreringscertifikat, hvilket føjes til en revisionsklar ydelseshistorik for hvert instrument. Når justeringer er nødvendige, yder ISO-certificerede kalibreringslaboratorier ekspertservice med producentanbefalede dele og smøremidler.
Rainin og METTLER TOLEDO er verdens største pipetteserviceorganisation med hurtig ekspeditionstid fra mail-in og onsite-servicemuligheder. Servicelaboratorier er ISO 17025-certificerede, og procedurerne følger 2022-opdateringen til ISO 8655.
Pipettenøjagtighed - eller korrekthed, som det kaldes nu - er forskellen mellem det gennemsnitlige volumen af alle målinger (4-10 målinger) og det indstillede volumen.
Præcision er standardafvigelsen for alle udførte målinger. Hvor langt fra hver læsning er de andre?
En pipettes usikkerhed er den kvantitative betegnelse for dens samlede nøjagtighed. Det er en kombination af korrekthed (et mål for systematisk fejl) og præcision (et mål for tilfældig fejl).
Ligningen for usikkerhed er:
Usikkerhed = Systematisk fejl + Tilfældig fejl * k. k (dækningsfaktor eller Z-score) afhænger af antallet af målinger. k=3,31 for fire målinger og 2 for ti målinger.
Opbevar pipetter lodret, hængende fra en hylde eller pipettestativ. Hold pipetterne rene og fri for forurenende stoffer. Hold rørholdere til pipettespidser lukkede.