 |
Regulace teploty představuje v mnoha aplikacích UV/VIS spektroskopie důležitý parametr, zejména v případě biologických vzorků citlivých na teplotu. V našem novém průvodci se zabýváme důležitostí regulace teploty a uvádíme příklady obvyklých aplikací, jako jsou aktivita lipázy, denaturace proteinů, bod tání DNA a Michaelis-Mentenové kinetika β-galaktosidázy.
Průvodce obsahuje též podrobné informace o termostatických řešeních pro UV/VIS spektrofotometry METTLER TOLEDO Excellence:
- CuveT – regulace teploty pro jednotlivé vzorky
- CuvetteChanger – regulace teploty pro vyšší počet vzorků
1. Celkové shrnutí
Tento průvodce se zabývá důležitostí přesné regulace teploty pro UV Vis spektroskopická měření a uvádí příklady z běžných biologických aplikací. Dále obsahuje též praktické rady a tipy pro přesné UV Vis měření za zvýšené teploty s využitím příslušenství CuveT a CuvetteChanger k UV/VIS přístrojům METTLER TOLEDO řady Excellence.
2. Úvod
Temperováním se v UV Vis spektroskopii rozumí obvykle nastavení definovaných teplotních podmínek a) před, b) v průběhu nebo c) po dokončení spektroskopického měření, jak blíže uvádíme na příkladech níže:
a) Vzorky/analyty může být třeba udržovat při přesné teplotě s cílem zpozdit rozklad nebo zajistit ideální podmínky pro reakci prekurzorů požadované pro následnou (chemickou) reakci, kterou lze spektroskopicky analyzovat za stanovené teploty.
b) Vytvoření teplotních podmínek, které jsou buď konstantní, nebo se mění na základě definované rychlosti teplotních změn. Takové podmínky katalyzují chemické reakce určené ke spektroskopickému sledování.
c) Obnovení předchozích nebo vytvoření odlišných teplotních podmínek pro následná spektroskopická měření s cílem sledovat reverzibilní (chemické) reakce.
[…]
Více informací si můžete přečíst v našem Průvodci správnou temperovanou UV/VIS analýzou
3. Příklady aplikací teplotně závislé UV Vis spektroskopie
3.1 Stanovení lipázové aktivity
Stanovení lipázové aktivity slouží coby příklad aplikace, která vyžaduje teplotu vyšší, než je teplota okolí, k vytvoření ideálních podmínek chemické reakce s enzymovou katalýzou určené ke spektroskopickému sledování.
[…]
3.2 Tepelná denaturace proteinů
[…]
3.3 Michaelis-Mentenové kinetika β-galaktosidázy
[…]
3.4 Bod tání DNA
[…]
Více informací si můžete přečíst v našem Průvodci správnou temperovanou UV/VIS analýzou
4. Temperační jednotka METTLER TOLEDO CuveT s Peltierovým termostatem
CuveT je termoelektrický termostat na kyvety (fungující na Peltierově principu), který v UV Vis spektroskopických aplikacích zajišťuje efektivní regulaci teploty v rozmezí od 4 °C do 95 °C. Tento temperační systém lze připojit k UV/VIS spektrofotometrům METTLER TOLEDO Excellence UV7, UV5Bio a UV5. Jednotka se umísťuje bez použití nástrojů přímo na spektrofotometr.
[…]
Více informací si můžete přečíst v našem Průvodci správnou temperovanou UV/VIS analýzou
5. Praktické rady a tipy pro temperování s jednotkou CuveT
Tato kapitola obsahuje užitečné rady a tipy pro rutinní temperovanou UV/VIS spektroskopii s využitím jednotky CuveT v podobě nejčastějších dotazů a odpovědí na ně.
[…]
Více informací si můžete přečíst v našem Průvodci správnou temperovanou UV/VIS analýzou
6. Temperování s využitím podavače kyvet METTLER TOLEDO CuvetteChanger
Podavač kyvet CuvetteChanger umožňuje automatické měření sérií obsahujících až 8 kyvet, a to jak s odpočtem blanku, tak v komplexních kinetických aplikacích. Při použití externího termostatu lze temperovat vzorky v kyvetách při teplotách 10–80 °C.
[…]
Více informací si můžete přečíst v našem Průvodci správnou temperovanou UV/VIS analýzou
7. Seznam použité literatury
[1] www.mt.com/uv-vis
[2] www.mt.com/cuvet-peltier-uvvis
[3] Determination of Lipase Activity, Method PNAB-LIP39, Biocon Española S.A.
[4] Journal of Chemical Education, March 2000, DOI: 10.1021/ed077p 380
[5] 1. Enzyme Handbook, II, Barman, T. E., Springer- Verlag (Berlin-Heidelberg: 1969), p. 581.
