Kiểm soát nhiệt độ là một thông số quan trọng trong nhiều ứng dụng đo Quang phổ UV / VIS, đặc biệt đối với các mẫu hữu cơ nhạy cảm với nhiệt độ. Sổ tay này sẽ giải thích cho bạn lý do tại sao đó là một yếu tố quan trọng trong các ứng dụng thường được sử dụng như hoạt động lipase, biến tính protein, điểm nóng chảy của DNA và động lực học Michaelis-Menten của beta-galactosidase.
Hướng dẫn này cũng cung cấp thông tin chi tiết về các giải pháp điều nhiệt có sẵn cho máy quang phổ kế METTLER TOLEDO UV / VIS Excellence:
- CuveT - Kiểm soát nhiệt độ mẫu đơn
- CuvetteChanger - Kiểm soát nhiệt độ nhiều mẫu
1. Tóm Tắt
Hướng dẫn này mô tả tầm quan trọng của đo nhiệt độ chính xác trong quang phổ UV / VIS được minh họa bằng các ví dụ ứng dụng thường được sử dụng trong khoa học đời sống. Ngoài ra, các mẹo và gợi ý thực tế được cung cấp để đo UV / VIS chính xác ở nhiệt độ cao với các phụ kiện CuveT và CuvetteChanger cho dòng METTLER TOLEDO UV / VIS Excellence.
2. Giới thiệu
Điều chỉnh nhiệt độ trong quang phổ UV / VIS thường có nghĩa là thiết lập các điều kiện nhiệt độ xác định a) trước, b) trong hoặc c) sau khi đo quang phổ, như được minh họa dưới đây:
a) Các mẫu / chất phân tích có thể cần được giữ ở nhiệt độ chính xác để làm chậm lại quá trình phân hủy hoặc cung cấp các điều kiện lý tưởng cho tiền phản ứng và sau đó để tạo ra chất cần thiết cho phản ứng (hóa học) tiếp theo, cuối cùng là được phân tích bằng quang phổ ở nhiệt độ cụ thể.
b) Thiết lập các điều kiện nhiệt độ không đổi hoặc thay đổi theo một giao thức tăng nhiệt độ xác định. Những điều kiện như vậy xúc tác cho các phản ứng hóa học, cần được theo dõi bằng quang phổ.
c) Thiết lập lại các điều kiện nhiệt độ trước đó hoặc khác nhau cho các phép đo phổ tiếp theo để theo dõi các phản ứng thuận nghịch (hóa học).
[Đọc tiếp]
Nhận thêm thông tin trong Hướng dẫn quyền phân tích UV / VIS của bộ điều chỉnh nhiệt
3. Ví dụ ứng dụng cho Quang phổ UV / VIS phụ thuộc nhiệt độ
3.1 Xác định hoạt tính lipase
Việc xác định hoạt tính lipase đóng vai trò là một ví dụ trong đó nhiệt độ tăng cao hơn các điều kiện môi trường được yêu cầu để thiết lập các điều kiện lý tưởng cho phản ứng hóa học được xúc tác bởi enzyme cần được theo dõi bằng quang phổ.
[…]
3.2 Biến tính protein do nhiệt độ
[…]
3.3 Động lực học Michaelis-Menten của beta - galactosidase
[…]
3.4 Nhiệt độ nóng chảy của DNA
[…]
Nhận thêm thông tin trong Hướng dẫn quyền phân tích UV / VIS của bộ điều chỉnh nhiệt
4. Bộ điều nhiệt Peltier của METTLER TOLEDO CuveT
3.1 Xác định hoạt tính lipase
Việc xác định hoạt tính lipase đóng vai trò là một ví dụ trong đó nhiệt độ tăng cao hơn các điều kiện môi trường được yêu cầu để thiết lập các điều kiện lý tưởng cho phản ứng hóa học được xúc tác bởi enzyme cần được theo dõi bằng quang phổ.
[…]
3.2 Biến tính protein do nhiệt độ
[…]
3.3 Động lực học Michaelis-Menten của beta - galactosidase
[…]
3.4 Nhiệt độ nóng chảy của DNA
[…]
Nhận thêm thông tin trong Hướng dẫn quyền phân tích UV / VIS của bộ điều chỉnh nhiệt
CuveT là một bộ điều nhiệt nhiệt cuvette đơn (dựa trên Peltier) kiểm soát hiệu quả nhiệt độ trong khoảng từ 4 ° C đến 95 ° C trong các ứng dụng quang phổ UV / VIS. Hệ thống điều nhiệt này có thể được kết nối với máy quang phổ UV7, UV5Bio và UV5 UV / VIS Excellence từ METTLER TOLEDO. Thiết bị được đặt trên đỉnh của máy đo quang phổ và không có công cụ nào được yêu cầu để cài đặt.
[…]
Nhận thêm thông tin trong Hướng dẫn phân tích UV / VIS của bộ điều chỉnh nhiệt
5. Lời khuyên và gợi ý thiết thực cho việc phân tích nhiệt bằng CuveT
Chương này cung cấp các mẹo và gợi ý thiết thực cho các phép đo phổ UV / VIS được điều hòa thường xuyên với CuveT trên cơ sở Câu hỏi thường gặp.
[…]
Nhận thêm thông tin trong Hướng dẫn quyền phân tích UV / VIS của bộ điều chỉnh nhiệt
6. Điều chỉnh nhiệt độ với CuvetteChanger METTLER TOLEDO
METTLER TOLEDO - CuvetteChanger cho phép đo chuỗi tự động hiệu quả lên đến 8 cuvet để đo với phép trừ trống hoặc các ứng dụng động học phức tạp. Với việc sử dụng bộ điều chỉnh nhiệt bên ngoài, có thể điều chỉnh các mẫu nhiệt trong các cuvet trong phạm vi nhiệt độ từ 10 nhiệt80 ° C.
[…]
Nhận thêm thông tin trong Hướng dẫn quyền phân tích UV / VIS của bộ điều chỉnh nhiệt
7. Tài liệu tham khảo
[1] www.mt.com/uv-vis
[2] www.mt.com/cuvet-peltier-uvvis
[3] Determination of Lipase Activity, Method PNAB-LIP39, Biocon Española S.A.
[4] Journal of Chemical Education, March 2000, DOI: 10.1021/ed077p 380
[5] 1. Enzyme Handbook, II, Barman, T. E., Springer- Verlag (Berlin-Heidelberg: 1969), p. 581.