紫外可視分光法を用いたBCA タンパク質アッセイの濃度測定 (日本語版）

ビシンコニン酸（BCA）アッセイが、生物サンプル中の総タンパク質濃度の比色検出および定量化でどのように使用されるかについて記載しています。詳細については、ダウンロードしてください。

BCAアッセイはどのように測定するのでしょうか？  

ビシンコニン酸 (BCA) アッセイは、比色検出および生物サンプル中の総タンパク質濃度の定量化として使用されます。 BCAタンパク質アッセイは、最大5％の界面活性剤を含むサンプルと適合性があります。さらに、簡単で比較的安定した色の複合体です。あらゆる感度を応ずる温度変化に強いことが、このタンパク質アッセイの利点です。

反応の第1段階は、アルカリ性溶液中のペプチド結合によってCu2+イオンをCu1+イオンに還元します。還元されたCu2+の量は、溶液中に存在するタンパク質量に比例します。次に、1つの第一銅（Cu1+）を有する2分子のBCAがキレートを形成し、その結果、紫色を呈するようになります。標準タンパク質としてウシ血清アルブミン（BSA）を使用し、562nm波長で測定を行います。

このアプリケーションではメトラー・トレドの 分光光度計 UV7 と CuvetteChanger を使用しています。