Pipette per la ricerca sulla risposta cellulare allo stress

Tutti gli organismi sono esposti a stress, sia a breve che a lungo termine, nel corso della loro vita. Di conseguenza, genomi, epigenomi e proteomi delle cellule possono subire danni che devono essere riparati per il mantenimento delle loro normali funzioni. Tuttavia, con l'invecchiamento, la capacità degli organismi di rispondere a stress ordinari e straordinari, come temperature elevate o tossine, si riduce.

La ricerca condotta dal laboratorio Dillin presso l'Università della California, a Berkeley, si concentra sul modo in cui gli organismi reagiscono allo stress e ne mitigano gli effetti a livello cellulare, e indaga su come riuscire a stimolare tali reazioni negli organismi in fase di invecchiamento. In particolare, il lavoro dei ricercatori mira a scoprire come ridurre l'incidenza di malattie legate all'età e direttamente correlate a un indebolimento della risposta allo stress, come diabete e cancro, per promuovere un invecchiamento più sano.

Il dott. Ryo Higuchi-Sanabria nel laboratorio Dillin dell'Università della California, a Berkeley

Una componente importante del lavoro del laboratorio Dillin è diretta a scoprire i percorsi genetici implicati nella risposta allo stress.Ryo Higuchi-Sanabria, uno dei ricercatori del laboratorio, esplora quest'area di studio nel sistema modello C. elegans utilizzando lo screening dell'intero genoma e la validazione del target. Un approccio chiave è rappresentato dalle schermate RNA (RNAi), in cui i nematodi di C. elegans sono esposti a una libreria RNAi memorizzata nel formato a 96 o 384 pozzetti.

Ogni pozzetto della libreria contiene una cassetta che può "abbattere" uno dei circa 20.000 geni C. elegans, cosicché i nematodi trattati con questa cassetta sono effettivamente privi della funzione dell'RNA o della proteina che essa codifica. I nematodi vengono successivamente sottoposti a determinate tipologie di trattamenti stressanti. Se i nematodi che non hanno la funzione di un particolare prodotto genetico hanno migliorato o ridotto la sopravvivenza dopo il trattamento da stress, i percorsi genetici in cui si trovano possono svolgere un ruolo nella risposta allo stress.

Dopo aver identificato tramite screening i geni candidati correlati allo stress, il dott. Higuchi-Sanabria e i suoi colleghi usano la PCR quantitativa per verificare che l'espressione genica sia stata effettivamente "abbattuta" nei nematodi analizzati. Date le migliaia di geni di C. elegans, la preparazione di librerie, la definizione degli screening e la validazione di geni candidati richiedono un gran numero di pipettaggi, e il laboratorio Dillin fa grande affidamento sulle pipette multicanale Rainin di METTLER TOLEDO.

Nel 2018, METTLER TOLEDO ha lanciato la sua prima iniziativa Supporting Science, mettendo in palio una pipetta scelta dal vincitore. Il dott. Higuchi-Sanabria aveva precedentemente discusso con Larry Joe, responsabile del laboratorio Dillin, dell'acquisto di altre pipette multicanale Rainin. Era interessato in particolare a una pipetta multicanale regolabile in ampiezza da utilizzare per trasferire i campioni tra le provette per microcentrifughe di un rack e le piastre a 96 o 384 pozzetti o, in alternativa, a una pipetta multicanale da 2-20 µl in grado di trasferire in modo accurato e ripetibile campioni limitati (3-12 µl) tra le strisce PCR e le piastre dei pozzetti.

Nella speranza di riuscire a ottenerne una gratuitamente, Larry Joe ha incoraggiato il dott. Higuchi-Sanabria a partecipare al concorso Supporting Science, che il ricercatore ha finito con l'aggiudicarsi grazie a un saggio che metteva a confronto il suo precedente livello di efficienza come barista rispetto alla sua produttività attuale presso il laboratorio Dillin.

METTLER TOLEDO è lieta di annunciare che il dott. Higuchi-Sanabria e il laboratorio Dillin hanno optato per una pipetta multicanale elettronica da 2-20 µl, che permetterà di migliorare in modo accurato e affidabile la produttività nell'ambito dello screening e della validazione, senza alcun rischio di lesioni da sforzo ripetuto.

Soluzioni e prodotti collegati