96-wells pipetteren voor vroegtijdige identificatie van ziekten
Onderzoekers hebben recent een meer accurate methode ontwikkeld om bepaalde lysosomal storage diseases bij pasgeborenen te identificeren. De Rainin Liquidator 96 versnelt monstervoorbereiding en garandeert een hoge nauwkeurigheid in de diagnose van deze genetische ziekten.
 |
Lysosomal storage diseases (LSD) zijn een familie van stoornissen met mild tot ernstig invaliderende symptomen. Deze ziekten worden meestal veroorzaakt door de mutatie van eiwitten die betrokken zijn bij de lysosomal verwerking. De ernst van de symptomen hangt af van welke eiwitten gemuteerd zijn en hoe ze gemuteerd zijn, en verschillende factoren controleren genexpressie en omgevingsfactoren. Vaak is er sprake van een vertraging in de diagnose en behandeling van deze ziekten vanwege hun variabele presentatie en niet-specifieke symptomen.
Diagnose van LSD met tandem massaspectroscopie
In een artikel ingediend bij het Journal of Pediatrics, getiteld "“Identification of Infants at Risk for Developing Fabry, Pompe or Mucopolysaccharidosis-I from Newborn Blood Spots by Tandem Mass Spectrometry” door Scott et al., ontwikkelden de auteurs een methode die massaspectrometrie gebruikt om veel soorten LSD parallel te screenen. Zij namen eerst gedroogde bloedvlekken van pasgeborenen, waarin vele lysosomal enzymen hun activiteit behouden, en hersuspendeerden ze in een buffer met de juiste enzymsubstraten voor de enzymen waarvan de tekortkomingen leiden tot ziekten. Met tandem massaspectrometrie kon het team onderscheiden of een baby met een bepaalde enzymactiviteit tekortschoot. Afhankelijk van de enzymactiviteit in een bepaalde bloedvlek, analyseerden de auteurs de gensequenties van pasgeborenen om te bevestigen of lage enzymactiviteit gemeten in de assay correleerde met mutaties in hetzelfde enzym. Scott et al. vond dat hun methode de kans vergrootte voor de detectie van Fabry, Pompe en mucopolysaccharidosis I boven die van standaard klinische diagnoses.
Liquidator 96 – het uitgelezen instrument
De experimenten vereisten de analyse van meer dan 100.000 bloedvlekken. Een dergelijk hoog aantal monsters vereist een nauwkeurige en systematische monstervoorbereiding. Kleine hoeveelheden van elke bloedvlek werden geplaatst in een 96-wells-plaat. Met de Liquidator 96 van METTLER TOLEDO konden de onderzoekers enzymreactie-oplossing, reactie quench en product extractiemiddelen snel en nauwkeurig op de plaat toevoegen. Deze monsters werden vervolgens gebruikt voor tandem massaspectrometrie.
The Liquidator 96 is een uiterst nauwkeurige tafelmodel 96-wells pipetteerinstrument dat geen elektriciteit voor gebruik nodig heeft. Met 96-kanaals pipetteren tegelijkertijd kan de Liquidator 96 experimentele werkstromen aanzienlijk versnellen boven wat mogelijk is met enkel- en meerkanaalspipetten. In tijd-kritische toepassingen, zoals enzymatische reacties, is het vooral belangrijk dat de reactie wordt gestart in alle 96-wells tegelijkertijd. De Liquidator 96 voert deze taak eenvoudig en nauwkeurig uit en voorkomt het gevaar van overgeslagen rijen, een gangbaar scenario met meerkanaals pipetteren in 96-wells-platen.
Meer informatie over Liquidator 96 toepassingen en download white papers en application notes