แนวทางปฏิบัติในการปิเปตที่ดี: ผลลัพธ์ที่ดีขึ้นผ่านการฝึกอบรมและการสนับสนุน

การใช้งานด้านวิทยาศาสตร์เพื่อชีวิตส่วนใหญ่มีขั้นตอนการจัดการของเหลวที่สําคัญ ซึ่งปริมาตรปิเปตมีผลโดยตรงต่อผลลัพธ์ หากการปิเปตไม่สม่ําเสมอและแม่นยํา เวลา เงิน และวัสดุอาจสูญเปล่า การปิเปตที่แม่นยําเป็นรากฐานของงานที่ทําซ้ําได้ ซึ่งจําเป็นต่อการสร้างข้อมูลที่มีความหมาย

ขั้นตอนแรกในการปรับปรุงความแม่นยําในการปิเปตคือการเลือกประเภทปิเปตที่เหมาะสมและช่วงปริมาตรที่เหมาะสม สําหรับขนาด ให้เลือกปิเปตที่มีปริมาตรต่ําที่สุดซึ่งจะรองรับปริมาตรที่คุณกําลังปิเปต ตัวอย่างเช่น หากคุณกําลังปิเปต 2 μL และมีปิเปต 5 μL และปิเปต 20 μL คุณจะได้ความแม่นยําที่ดีขึ้นเมื่อใช้ปิเปต 5 μL 

ดู เอกสารไวท์เปเปอร์ เกี่ยวกับการเลือกปิเปตเพื่อทําความเข้าใจว่าปิเปตชนิดใดเหมาะกับของเหลวและปัจจัยอื่นๆ ที่เหมาะกับสถานการณ์ของคุณมากที่สุด: การเลือกปิเปตที่เหมาะสม

เมื่อคุณมีเครื่องมือที่เหมาะสมแล้ว ให้นําเทคนิคการปิเปตที่ดีของคุณไปปฏิบัติ กําหนดตารางการทดสอบเป็นประจําเพื่อเพิ่มความน่าเชื่อถือในผลลัพธ์ของคุณเมื่อเวลาผ่านไป และเช่นเดียวกับเครื่องมือที่มีความแม่นยําอื่นๆ ให้แน่ใจว่าได้จัดตั้งบริการและระบบการสอบเทียบจากผู้เชี่ยวชาญอย่างสม่ําเสมอ

วิธีที่ง่ายที่สุดในการทดสอบความแม่นยําของปิเปตอย่างรวดเร็วอาจเป็น Rainin SmartCheck ดูข้อมูลเพิ่มเติมได้ที่ mt.com/SmartCheck 

การเลือกปิ เปต ที่เหมาะสมเกี่ยวข้องกับการประเมินความต้องการของคุณ ขั้นแรก คุณกําลังปิเปตตัวอย่างประเภทใด พวกเขาเป็นน้ําหรือไม่? หรือมีความหนืด ระเหย เกิดฟอง กัดกร่อน หรือเป็นอันตราย? สําหรับของเหลวที่เป็นน้ําและใกล้น้ํา ปิเปตแบบกระจายอากาศที่พบบ่อยที่สุด (เรียกอีกอย่างว่าปิเปต "เบาะลม") เป็นตัวเลือกที่ดี สําหรับของเหลวที่มีความหนืด ระเหยง่าย และของเหลวประเภทอื่นๆ ที่ผิดปกติ ปิเปตแบบดิสเพลสชั่นบวกจะเป็นตัวเลือกที่ดีกว่าสําหรับทั้งความแม่นยําและความปลอดภัย 

คุณจะปิเปตในปริมาณเท่าใด คุณต้องถ่ายโอนตัวอย่างจากเรือหนึ่งไปยังอีกภาชนะหนึ่งกี่ตัวอย่าง? ดูเอกสาร ไวท์เปเปอร์เกี่ยวกับการเลือกปิเปต เพื่อทําความเข้าใจว่าปิเปตชนิดใดทํางานได้ดีที่สุดโดยขึ้นอยู่กับของเหลวและปัจจัยอื่นๆ เฉพาะในสถานการณ์ของคุณ

การปิเปตในปริมาณที่น้อยที่สุดเท่าที่จะเป็นไปได้นั้นเกี่ยวข้องกับเครื่องมือและเทคนิคเฉพาะทาง ปิเปตแบบทวนสัญญาณอาจเป็นตัวเลือกที่ดีที่สุดของคุณในการจ่ายปริมาตรซ้ําได้ถึง 100 nL ปิเปตอีกอันสามารถจ่ายได้เพียงไม่กี่ครั้ง ตรวจสอบให้แน่ใจว่าได้ใช้ปิเปตขนาดเล็กที่สุดที่จะรองรับปริมาตรที่คุณต้องการปิเปต 

เทคนิคการปิเปตมีผลกระทบต่อความแม่นยําและความสามารถในการทําซ้ําตามสัดส่วนที่ปริมาณที่ต่ํามาก ความลึกของการแช่ มุมปิเปต และอัตราการดูดเป็นสิ่งสําคัญในการควบคุม โปสเตอร์เทคนิคการปิเปตจาก Rainin สามารถช่วยได้

Rainin NanoRep จ่ายซ้ําได้ถึง 100 nL ค้นหาข้อมูลเพิ่มเติมได้ที่นี่: mt.com/NanoRep

ปัจจัยที่สําคัญที่สุดในการปิเปตแบบหลายช่องทางที่แม่นยําและทําซ้ําได้คือความสมบูรณ์ของซีลสําหรับทุกช่องของปิเปต นั่นหมายความว่าทุกทิปพอดีกับแต่ละเพลาโดยไม่มีการรั่วไหลของอากาศ ผู้ผลิตหลายรายบรรลุเป้าหมายนี้ด้วยวิธีที่แตกต่างกัน ด้วยความสะดวกตามหลักสรีรศาสตร์และระดับความสม่ําเสมอในการปิดผนึกที่แตกต่างกัน ทิปปิเปต LTS LiteTouch System จาก Rainin ต้องการแรงน้อยที่สุดในการโหลดและดีดออกจากหลายช่องสัญญาณ และปิดผนึกอย่างสม่ําเสมอทุกครั้ง

คลิกที่นี่เพื่อดูปิเปตหลายช่องที่หลากหลายของ Rainin

เมื่อดูดอากาศ ให้ถือปิเปตให้ใกล้กับแนวตั้งมากที่สุด โดยหลีกเลี่ยงมุมที่มากกว่า 20° จากแกน Y เมื่อจ่าย หากคุณกําลังสัมผัสผนังของภาชนะเป้าหมายเพื่อดึงของเหลวทั้งหมดออกจากปลายจนสุด ก็ไม่เป็นไรที่จะทํามุมเกิน 20°

การปิเปตไปข้างหน้าเป็นเทคนิคการปิเปตมาตรฐานและเป็นตัวเลือกที่ดีที่สุดสําหรับตัวอย่างที่เป็นน้ํา สําหรับตัวอย่างที่มีความหนืดและระเหยง่าย การปิเปตแบบย้อนกลับจะให้ความแม่นยําที่ดีกว่า

หากต้องการส่งปิเปตไปข้างหน้า ให้ดันลูกสูบลงไปที่จุดแรกในขณะที่ถือปิเปตไว้นอกของเหลว จากนั้นจุ่มปลายลึก 2-10 มม. ลงในของเหลวที่คุณกําลังทํางานอยู่ – ไม่ลึกกว่านี้ ปล่อยลูกสูบอย่างช้าๆ จนสุดเพื่อดูดปริมาตรของเหลวที่สมบูรณ์ ในการจ่ายลงในภาชนะเป้าหมายของคุณ ให้เลื่อนปิเปตเข้าไปในภาชนะ จากนั้นกดลูกสูบในอัตราที่เท่ากันผ่านจุดหยุดแรกจนถึงจุดที่สอง – เท่าที่ลูกสูบไป เมื่อกดลูกสูบจนสุดแล้ว ให้ลากปลายปิเปตขึ้นเบา ๆ ที่ผนังของภาชนะเพื่อ "สัมผัส" สิ่งนี้ช่วยจ่ายปริมาณของเหลวให้เต็มอย่างสมบูรณ์ ปล่อยลูกสูบ ดีดปลายปิเปต ใส่ปลายปิเปตใหม่ แล้วทําซ้ํา

ในการย้อนกลับปิเปต ให้ดันลูกสูบลงจนสุดผ่านจุดหยุดแรกไปยังจุดที่สอง – เท่าที่ลูกสูบไป จากนั้นจุ่มปลายลงในของเหลวแล้วค่อยๆ ปล่อยลูกสูบเพื่อดูด ย้ายไปที่ภาชนะรับและกดลูกสูบไปที่จุดแรกเท่านั้นเพื่อจ่ายระดับเสียงที่ถูกต้อง ปริมาตรที่เหลือเล็กน้อยจะยังคงอยู่ในปลายปิเปต ย้ายปิเปตไปเหนือภาชนะทิ้งและกดลูกสูบลงไปที่จุดที่สอง หรือที่เรียกว่าตัวหยุด "ระเบิด" เพื่อปล่อยของเหลว ที่เหลืออยู่

ปล่อยลูกสูบ ดีดปลายปิเปต ใส่ปลายปิเปตใหม่ แล้วทําซ้ํา

ปิเปตแบบเคลื่อนย้ายอากาศสามารถใช้ปิเปตของเหลวที่มีความหนืดเล็กน้อย รวมถึงเลือดได้ เพื่อให้ได้ความแม่นยําสูงสุด ให้ใช้เทคนิคการปิเปตแบบย้อนกลับที่อธิบายไว้ข้างต้น สําหรับของเหลวที่มีความหนืดมากขึ้น เช่น กลีเซอรอล 85% หรือ Triton X-100 ปิเปตแบบดิสเพลสเมนต์บวกจะให้ความแม่นยําและความสม่ําเสมอที่ดีที่สุด

ของเหลวที่ระเหยได้เล็กน้อย เช่น เอทานอล สามารถปิเปตด้วยปิเปตแบบเคลื่อนย้ายอากาศได้โดยใช้เทคนิคการปิเปตแบบย้อนกลับที่กล่าวถึงข้างต้น อย่างไรก็ตาม ปิเปตแบบดิสเพลสเมนต์บวกเป็นตัวเลือกที่ดีกว่าสําหรับของเหลวระ เหยง่าย

หากใช้ปิเปตแบบเคลื่อนย้ายอากาศ ให้ล้างปลายปิเปตล่วงหน้า (ดูดและจ่าย) อย่างน้อยห้าครั้งก่อนปิเปตปริมาตรของคุณ สิ่งนี้ทําให้อากาศภายในปิเปตสมดุล ทําให้อัตราการระเหยของของเหลวช้าลง การระเหยอย่างรวดเร็วของของเหลวระเหยง่ายจะขยายอากาศภายในปิเปตและบังคับให้ของเหลวออกจากทิปโดยไม่ต้องกดดันลูกสูบ และสิ่งนี้จะลดการส่งมอบปริมาตรที่แม่นยํา

ของเหลวระเหยง่าย เช่น อะซิโตไนไตรล์ โดยทั่วไปจะจัดการได้ดีกว่าด้วยปิเปตแบบดิสเพลสเพลสเมนต์เชิงบวก

ใช่ การปิเปตด้วยปิเปตแบบแทนที่อากาศสามารถสร้างละอองลอยได้ ละอองลอยสามารถลอยขึ้นสู่ด้านในของปิเปตและปนเปื้อนผนังภายในและลูกสูบ ละอองลอยเกิดขึ้นได้ง่ายขึ้นเมื่อปล่อยลูกสูบเร็วเกินไประหว่างการดูด และยังสามารถเกิดขึ้นในทิศทางตรงกันข้ามนอกปิเปตด้วยการจ่ายเร็ว เกินไป

เพื่อลดละอองลอย ให้ดูดและจ่ายอย่างช้าๆ และสม่ําเสมอ ใช้เคล็ดลับที่ กรองแล้ว

ปิเปตแบบดิสเพลสชั่นบวกใช้ทิปแบบกระบอกฉีดยาที่ป้องกันการเกิดละอองลอย ปิเปตแบบดิสเพลสชั่นบวกเป็นตัวเลือกที่ดีที่สุดสําหรับการปิเปตของเหลวที่เป็นอันตรายและของเหลวที่มีความหนืดหรือความผันผวนสูง

ของเหลวที่เย็นหรือร้อนมากจะเปลี่ยนความดันอากาศภายในปิเปตแบบแทนที่อากาศ ซึ่งนําไปสู่การปิเปตที่ ไม่ถูกต้อง

ปิเปตแบบดิสเพลสซีเมนต์บวกที่มีทิปแบบกระบอกฉีดยาที่ไม่มีช่องอากาศระหว่างของเหลวและลูกสูบ จะไม่ได้รับผลกระทบจากอุณหภูมิที่แตกต่างกันของของเหลว ปิเปตแบบดิสเพลสซิสเมนต์บวกจะให้ผลลัพธ์ที่แม่นยําด้วยของเหลวที่ไม่ใช่อุณหภูมิห้อง

หากคุณต้องปิเปตของเหลวที่ร้อนหรือเย็นมากด้วยปิเปตแบบเคลื่อนย้ายอากาศ อย่าล้างปลายปิเปตล่วงหน้า ซึ่งโดยทั่วไปจะเป็นแนวทางปฏิบัติที่ดีที่สุดเพื่อความแม่นยําสูงสุด ให้ดูดและจ่ายออกอย่างรวดเร็วเพื่อลดผลกระทบของอุณหภูมิของของเหลวต่อช่องว่างอากาศภายในของปิเปต

เพื่อหลีกเลี่ยงฟองอากาศและฟองเมื่อปิเปต อย่าจุ่มปลายเกิน 10 มม. ในอ่างเก็บน้ําของเหลว และดูดช้าๆ

การปิเปตแบบย้อนกลับให้การปกป้องเพิ่มเติม เนื่องจากก่อนการดูด คุณกดลูกสูบจนสุดจนถึงจุดที่ 2 ดังนั้นจึงไม่มีโอกาสฉีดอากาศเข้าไปในตัวอย่างของเหลว สําหรับข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับการปิเปตแบบย้อนกลับ โปรดไปที่ หน้า นี้

ปิเปตแบบดิสเพลสซีเมนต์บวกจะไม่สร้างฟองอากาศหรือโฟมเมื่อทําปฏิกิริยากับของเหลว เนื่องจากปลายแบบเข็มฉีดยาไม่มีอากาศให้ของเหลวโต้ตอบด้วย

ขจัดสิ่งปนเปื้อนของปิเปตโดยเช็ดด้วยผ้าเปียกและผงซักฟอก เช่น ไอโซโพรพานอลหรือสารละลายฟอกขาว 10% หลีกเลี่ยงหน้าต่างพลาสติกใสของไมโครมิเตอร์

การนึ่งฆ่าเชื้ออาจเป็นอีกทางเลือกหนึ่ง แต่โปรดตรวจสอบข้อมูลจําเพาะของเครื่องมือปิเปตของคุณ หากสามารถนึ่งฆ่าเชื้อได้เครื่องมือทั้งหมดถูกนึ่งฆ่าเชื้อหรือเฉพาะปลายของเหลวเท่านั้น?  บ่อยครั้งที่สามารถนึ่งฆ่าเชื้อได้เฉพาะปลายของเหลวเท่านั้น

สําหรับข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับการทําความสะอาดปิเปต โปรดดูโปสเตอร์การทําความสะอาดปิเปต

การสอบเทียบคือการวัดอัตราความผิดพลาดอย่างเป็นระบบ (ความแม่นยํา) และอัตราความผิดพลาดแบบสุ่ม (ความแม่นยํา) ของปิเปตที่มีการควบคุมและจัดทําเป็นเอกสาร ในสภาพแวดล้อมในห้องปฏิบัติการหลายแห่ง ประสิทธิภาพของปิเปตต้องได้รับการทดสอบอย่างสม่ําเสมอและจัดทําเอกสารตามกฎหมายภายใต้เงื่อนไขเฉพาะที่ได้รับการรับรองจากหน่วยงานที่ ได้รับการรับรอง

ผู้ให้บริการที่ได้รับการรับรองมาตรฐาน ISO จะสอบเทียบปิเปตในการตั้งค่าที่มีการควบคุม ผลลัพธ์จะถูกบันทึกไว้อย่างปลอดภัยในใบรับรองการสอบเทียบ ซึ่งจะเพิ่มประวัติประสิทธิภาพที่พร้อมสําหรับการตรวจสอบสําหรับเครื่องมือแต่ละชิ้น เมื่อจําเป็นต้องปรับเปลี่ยน ห้องปฏิบัติการสอบเทียบที่ผ่านการรับรองมาตรฐาน ISO จะให้บริการโดยผู้เชี่ยวชาญพร้อมชิ้นส่วนและสารหล่อลื่นที่ ผู้ผลิตแนะนํา

Rainin และ METTLER TOLEDO เป็นองค์กรบริการปิเปตที่ใหญ่ที่สุดในโลกที่มีการตอบสนองที่รวดเร็วจาก ตัวเลือกบริการทางไปรษณีย์และนอกสถานที่ ห้องปฏิบัติการบริการได้รับการรับรองมาตรฐาน ISO 17025 และขั้นตอนเป็นไปตามการปรับปรุงปี 2022 เป็น ISO 8655 

ความแม่นยําของปิเปตหรือความจริงตามที่เรียกว่าในปัจจุบันคือความแตกต่างระหว่างปริมาตรเฉลี่ยของการวัดทั้งหมด (การวัด 4-10 ครั้ง) และปริมาตร ที่ตั้งไว้

ความแม่นยําคือค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานของการวัดทั้งหมดที่ดําเนินการ การอ่านอื่นห่างกันจากแต่ละการอ่านแค่ไหน?

ความไม่แน่นอนของปิเปตเป็นคําศัพท์เชิงปริมาณสําหรับความแม่นยําโดยรวม เป็นการผสมผสานระหว่างความจริง (การวัดข้อผิดพลาดอย่างเป็นระบบ) และความแม่นยํา (การวัดข้อผิดพลาดแบบสุ่ม) 

สมการสําหรับความไม่แน่นอนคือ: 

ความไม่แน่นอน = ข้อผิดพลาดอย่างเป็นระบบ + ข้อผิดพลาดแบบสุ่ม * k. k (ปัจจัยความครอบคลุมหรือคะแนน Z) ขึ้นอยู่กับจํานวนการวัด k=3.31 สําหรับการวัดสี่ครั้ง และ 2 สําหรับการวัดสิบครั้ง

เก็บปิเปตในแนวตั้ง แขวนไว้จากชั้นวางหรือแท่นวางปิเปต รักษาปิเปตให้สะอาดและปราศจากสิ่งปนเปื้อน ปิดชั้นวางทิปปิเปตไว้