I en mätning av brytningsindex spelar ljusstrålens våglängd roll på grund av dispersionens effekt på egenskaperna hos vågor i ett medium (känd som dispersionsrelation). Nästan alla ämnen har olika brytningsindex som också skiljer sig åt beroende på vilken våglängd som används. Detta spridningsförhållande kan beräknas på följande sätt.
Vi vet att ljusets hastighet i ett medium är:
v = c/n
Var:
n är brytningsindexet,
c är ljusets hastighet i vakuum (eller luft)
v är ljusets hastighet i mediet
På samma sätt är våglängden i samma medium:
λ = λ0/n
där λ0 är ljusets våglängd i vakuum (eller luft).
Därför är brytningsindexet (n) omvänt proportionellt mot våglängden och även mot ljusets hastighet. Det betyder att ju större våglängd, desto lägre brytningsindex. Detta förhållande representeras av ekvationen:
v(λ) = c/n(λ)
För industriella tillämpningar där brytningsindexmätning krävs är det dock nödvändigt att ha en definierad, exakt våglängd för att möjliggöra att brytningsindexmätningen av olika prover kan analyseras under samma förhållanden för kvalitetskontroll.
För att generera en definierad våglängd använder refraktometrar oftast natrium-D-linjen, som motsvarar 589,3 nm. På grund av det faktum att det är en allmänt tillgänglig, pålitlig och stabil ljuskälla har natrium D-linjen länge använts i studien av brytningsindex.