Stanovení obsahu proteinů a agregačního indexu lidské monoklonální protilátky (mAb) adalimumabu lze efektivně řídit na základě integrace analytického vážení a UV Vis spektrometrie do pracovního postupu podporovaného softwarem. Využití srovnatelně nákladově efektivních analytických přístrojů a dosažené zvýšení kvality výsledků při kvantitativní analýze a stanovení aktivity lidských mAb jsou pozoruhodné.
Význam kontroly kvality monoklonálních protilátek (mAb) v léčbě onemocnění
Protilátky mAb nejsou pouze terapeutickým přístrojem, ale představují i běžně používaný nástroj v laboratorním výzkumu. Díky své specifičnosti nabízejí cílenou stimulaci nebo inhibici buněčných procesů a představují důležité nástroje v léčbě nádorových a autoimunitních onemocnění. O mAb a jejich potenciální využití je stále větší zájem. Procesy související s vývojem, výrobou a distribucí mAb proto musí být řízené a reprodukovatelné, aby bylo zajištěno, že budou správně složené a stabilní, a tedy bezpečně aplikovatelné. Díky své nízké složitosti, specifičnosti a optimalizované době potřebné k dosažení výsledku představuje UV Vis spektrometrie výkonnou a nákladově efektivní analytickou techniku využitelnou zejména pro účely kontroly kvality, která zahrnuje stanovení koncentrace a čistoty. Úspěšné analýzy začínají přesnou přípravou vzorků, a proto je vysoce výkonná analytická váha ideálním doplňkem UV Vis spektrometru.
Problematická místa kontroly kvality mAb adalimumabu pomocí kvantitativní analýzy
Výzvou pro přesné a opakovatelné měření absorpce je přesné ředění závislé na typu adalimumabu specifickým pufračním roztokem na předem definovanou cílovou koncentraci. Tím jsou definovány odpovídající hodnoty absorpce při vlnové délce 280 a 320 nm, které by se měly pohybovat v rozmezí 0,05 až 0,5 A. Aby se dosáhlo nejvyšší přesnosti, měl by se proces ředění v ideálním případě provádět gravimetricky na analytické váze v souladu s platnými SOP. Absorpce při vlnové délce 320 nm se měří a odečítá od absorbance při vlnové délce 280 nm, aby se kompenzoval případný efekt zakalení, který by mohl změnit koncentraci proteinu.
Přísné pokyny k dodržování SOP zajišťují integritu výsledků
Pro dosažení nejvyšší úrovně zabezpečení pracovního postupu je žádoucí integrace obou analytických přístrojů (analytické váhy a UV Vis spektrometru) do pracovní stanice podporované softwarem. Laboratorní software LabX™ od společnosti METTLER TOLEDO takový přístup umožňuje díky integraci analytické váhy Excellence, jako je například XPR205 pro ředění vzorků, a UV/VIS spektrometru UV7 Excellence pro následné UV měření připravených vzorků. Konkrétní pracovní postupy zahrnující přípravu a měření vzorků, které jsou definovány v příslušných SOP, jsou převedeny do odpovídajících metod LabX. To umožňuje vynikající zprostředkování uživatelských pokynů prostřednictvím terminálu přístroje, kde se každý krok zobrazuje ve formě textových zpráv a konformací definovaných v rámci pracovního postupu. Veškeré údaje o procesu jsou uloženy v zabezpečené centralizované databázi. Díky plné podpoře zajišťování shody s předpisy vám software LabX pomůže vyhovět všem požadavkům na integritu dat dle normy FDA ALCOA+.
