Die Bestimmung des Proteingehalts sowie des Aggregationsindex des menschlichen monoklonalen Antikörpers (mAb) Adalimumab wird durch die Integration von analytischem Wägen und UV/VIS-Spektrometrie in einen softwaregestützten Workflow effizient verwaltet. Der Einsatz vergleichsweise kosteneffizienter Analysegeräte und die erzielte Steigerung der Resultatqualität bei der quantitativen Analyse und Aktivitätsbestimmung von menschlichen mAb sind bemerkenswert.
Die Bedeutung der Qualitätskontrolle von monoklonalen Antikörpern (mAb) für die Behandlung von Krankheiten
Monoklonale Antikörper sind nicht nur therapeutisch einsetzbar, sondern stellen auch ein gängiges Instrument in der Laborforschung dar. Aufgrund ihrer Spezifizität sorgen sie für eine gezielte Stimulation oder Inhibition der Zellprozesse und sind wichtige Werkzeuge bei der Behandlung von Krebs und Autoimmunkrankheiten. Das Interesse an mAbs und ihrer potenziellen Verwendung wächst immer mehr. Daher müssen die Prozesse in Bezug auf die Entwicklung, Produktion und Verteilung von mAbs kontrolliert und reproduzierbar sein, damit sie richtig gefaltet, stabil und anwendungssicher sind. Dank ihrer geringen Komplexität, ihrer Spezifität und der optimierten Zeit bis zum Resultat ist die UV/VIS-Spektrometrie eine leistungsstarke, kosteneffiziente Analysetechnik besonders für Qualitätskontrollen, die Konzentrations- und Reinheitsbestimmungen beinhalten. Da erfolgreiche Analysen mit einer genauen Probenvorbereitung beginnen, ist eine leistungsstarke Analysenwaage die ideale Ergänzung zu einem UV/VIS-Spektrometer.
Probleme bei der Qualitätskontrolle von Adalimumab mAbs durch die quantitative Analyse
Die Herausforderung für eine genaue und wiederholbare Absorptionsmessung besteht darin, eine Verdünnung mit der genauen Adalimumab-abhängigen spezifischen Pufferlösung auf die vordefinierte Zielkonzentration zu erreichen. Dies definiert die entsprechenden Absorptionswerte bei 280 und 320 nm, die zwischen 0,05 und 0,5 A liegen sollten. Um die höchste Genauigkeit zu erzielen, sollte der Verdünnungsprozess idealerweise gravimetrisch auf einer Analysenwaage gemäss der validierten Arbeitsanweisung durchgeführt werden. Die Absorption bei 320 nm wird gemessen und von der Absorption bei 280 nm abgezogen, um eventuelle Trübungseffekte auszugleichen, die eine Veränderung der Proteinkonzentration bewirken könnten.
Eine strenge standardisierte Arbeitsanweisung sichert die Integrität der Resultate
Um höchste Sicherheit beim Arbeitsablauf zu erreichen, ist die Integration beider Analysegeräte (Analysenwaage und UV/VIS-Spektrometer) in eine softwaregestützte Arbeitsstation wünschenswert. Die LabX™ Laborsoftware von METTLER TOLEDO ermöglicht einen solchen Ansatz durch Integration einer Excellence-Analysewaage wie z. B. XPR205 für die Probenverdünnung und eines UV7 Excellence UV/VIS-Spektrometers für die anschliessende UV-Messung der vorbereiteten Proben. Die spezifischen Arbeitsabläufe, die eine Probenvorbereitung und -messung enthalten und in den jeweiligen Arbeitsanweisungen definiert sind, werden in entsprechende LabX-Methoden übersetzt. Dadurch wird eine ausgezeichnete Benutzerführung über das Terminal des Instruments ermöglicht, bei der jeder Schritt in Form von entsprechenden Arbeitsanweisungen und Bestätigungen durch den Workflow angezeigt wird. Alle Prozessinformationen werden in einer sicheren, zentralen Datenbank gespeichert. LabX bietet volle Unterstützung bei der Einhaltung behördlicher Vorschriften und erfüllt die Anforderungen an die Datenintegrität gemäss FDA ALCOA+.
