Der ELISA Master Guide beschreibt die Durchführung von Enzyme-Linked Immunosorbent Assays (ELISAs) und gibt praktische Hinweise für die optimale Handhabung von Flüssigkeiten und die Auswahl von geeigneten Laborgeräten.
Das Leitfaden enthält Ratschläge von promovierte Zell- und Molekularbiologen mit umfassender Erfahrung bei der Durchführung von ELISAs zu den folgenden Themen:
- Auswahl des am besten geeigneten ELISA-Aufbaus für ihre Forschungsfrage
- Durchführung erfolgreicher ELISAs mit einer Reihe von Probentypen
- Verbesserung von Präzision und Reproduzierbarkeit
- Minimierung des Risikos ungenauer Ergebnisse
Diese Leitfaden gliedert sich in vier Teile:
- Ein Überblick über die verschiedenen Arten von ELISA (direkter, indirekter, Sandwich-, kompetitiver und ELISpot-Assay)
- Faktoren, die die Reproduzierbarkeit von ELISA-Protokollen beeinflussen: minderwertige Qualität von Reagenzien und Verbrauchsmaterialien, Kreuzkontamination, Pipettiertechniken, Kreuzreaktivität, Matrixeffekt, unterschiedliche Chargen von Reagenzien und Datenanalyse. Für jeden Aspekt werden praktische Tipps zur Bewältigung dieser Herausforderungen gegeben und die verschiedenen Arten von Liquid Handling Equipment erörtert
- Detaillierte Schritt-für-Schritt-Anleitung zur Durchführung eines ELISA-Arbeitsablaufs am Beispiel eines typischen Sandwich-ELISA, der in einer 96-Well-Platte durchgeführt wird.
- Eine Erörterung der grundlegenden Anwendungen von ELISAs in verschiedenen Bereichen der Forschung, Diagnostik, Biopharma und Biotechnologie. Dazu gehören praktische Beispiele für ELISA in der medizinischen Diagnostik, bei Lebensmittel- und Umwelttests, in der Arzneimittelforschung und -entwicklung sowie in der Qualitätskontrolle.