良好的移液操作规范：通过培训和支持获得更好的结果

大多数生命科学应用都包括关键的液体处理步骤，在这些步骤中，移液体积直接影响结果。如果移液不一致且不准确，那么时间、金钱和材料就会被浪费掉。准确的移液构成了可重复工作的基础，而可重复工作对于生成有意义的数据至关重要。

提高移液准确性的第一步是选择正确类型的移液器和适当的量程范围。对于尺寸，请选择容量最小的移液器，以适应您正在移液的体积。例如，如果您要移取 2 μL 移液器，并使用 5 μL 移液器和 20 μL 移液器，则使用 5 μL 移液器将获得更高的准确度。 

查看这份关于移液器选择 的白皮书 ，了解哪种移液器最适合液体以及适合您情况的其他独特因素： 选择合适的移液器

一旦您有了合适的仪器，就可以将您良好的移液技术付诸实践。制定常规测试计划，以最大限度地提高对结果的信任度，并且与任何精密仪器一样，确保制定定期的专家服务和校准方案。

快速测试移液器准确性的最简单方法可能是Rainin SmartCheck。在 mt.com/SmartCheck 上了解更多信息

选择合适的 移液器 需要评估您的需求。首先，您正在移液哪种样品？它们是水性的吗？或者它们是粘性的、挥发性的、起泡的、腐蚀性的或危险的？对于水性液体和近水性液体，最常见的空气置换式移液器（也称为“气垫”移液器）是一个不错的选择。对于粘性、挥发性和其他不寻常的液体类型，外置活塞式移液器在准确性和安全性方面都是更好的选择。 

您将进行多大体积的移液？从一个容器转移到另一个容器需要多少个样品？查看这份 关于移液器选择的白皮书 ，了解哪种移液器效果最好，具体取决于液体和适合您情况的其他因素。

尽可能小的移液体积涉及专门的仪器和技术。连续移液器可能是重复分液体积低至 100 nL 的最佳选择。另一支移液器也可以只用于几次分液。确保使用最小尺寸的移液器，以适应您希望移液的体积。 

在非常小的体积下，移液技术对准确性和可重复性的影响成比例地更大。浸入深度、移液角度和抽吸速率对于控制很重要。Rainin的 “移液技术”海报 可以提供帮助。

Rainin NanoRep 可重复分配低至 100 nL 的等分试样。在此处了解更多信息： mt.com/NanoRep

准确、可重复的多通道移液中，最重要的因素是移液器每个通道的密封完整性。这意味着每个尖端都完美地安装在每个轴上，并且不会漏气。不同的制造商以不同的方式实现这一目标，具有不同的人体工程学易用性和密封一致性水平。Rainin 的 LTS LiteTouch 系统移液器吸头从多通道加载和弹出时需要的力最小，并且每次都能始终如一地密封。

点击此处查看Rainin的各种多通道移液器。

吸吸时，将移液器尽可能靠近垂直方向，避免与 Y 轴成 20° 以上的任何角度。分配时，如果您要接触目标容器的壁以完全从尖端拉出所有液体，则可以超过 20° 角。

正向移液是标准的移液技术，也是水性样品的最佳选择。对于粘性和挥发性样品，反向移液可提供更高的准确度。

要向前移液器，请将柱塞向下推至第一个停止点，同时将移液器保持在液体之外。然后，将尖端浸入您正在使用的液体中 2-10 毫米深 - 不要更深。慢慢释放柱塞至完全伸展，以吸出全部液体体积。要分配到目标容器中，请将移液器移入容器中，然后以均匀的速率通过第一个挡块一直按压到第二个挡块 - 只要柱塞走得远。在柱塞完全按下的情况下，轻轻地将移液器的尖端拖到容器壁上以“接触”。这有助于完全分配全部液体体积。松开柱塞，弹出移液器吸头，装入新的移液器吸头，然后重复。

要反向移液器，将柱塞完全向下推，穿过第一个挡块到第二个挡块 - 只要柱塞走得远。然后，将尖端浸入液体中，缓慢而均匀地释放柱塞以吸出。移动到接收容器并将柱塞按至第一个停止以分配正确的体积。一小块残留量将留在移液器吸头中。将移液器移到丢弃容器上，然后将柱塞的其余部分向下压至第二个挡块，也称为“吹气”挡块，以释放任何剩余的液体。 

松开柱塞，弹出移液器吸头，装入新的移液器吸头，然后重复。

空气置换式移液器可用于移液轻微粘稠的液体，包括血液。为获得最大准确度，请使用上述反向移液技术。对于更粘稠的液体，如85%甘油或Triton X-100，外置活塞式移液器可提供最佳的准确性和一致性。

轻微挥发的液体（如乙醇）可以使用上述反向移液技术使用空气置换式移液器进行移液。然而，外置活塞式移液器是挥发性液体的更好选择。 

如果使用空气置换式移液器，请在移液体积之前至少预冲洗移液器吸头（吸液和分液）五次。这样可以平衡移液器内的空气，减慢液体的蒸发速度。挥发性液体的快速蒸发会膨胀移液器内的空气，并迫使液体从吸头流出，而不会对柱塞施加任何压力，这降低了准确的体积输送。

挥发性液体（如乙腈）通常最好使用外置活塞式移液器处理。

是的，使用空气置换式移液器进行移液会产生气溶胶。气溶胶会上升到移液器内部，并污染内壁和活塞。当柱塞在抽吸过程中释放得太快时，更容易发生气溶胶，并且如果分液速度过快，也可能在移液器外的相反方向发生气溶胶。 

为尽量减少气溶胶，请缓慢而均匀地吸吸和分配。使用过滤过的提示。 

外置活塞式移液器使用注射器式吸头，可防止气溶胶。外置活塞式移液器是移液危险液体和任何粘度或挥发性较高的液体的最佳选择。

非常冷或非常热的液体会改变空气置换式移液器内的气压，导致移液不准确。 

外置活塞式移液器具有注射器式吸头，液体和活塞之间没有气穴，不受液体不同温度的影响。外置活塞式移液器可在处理非室温液体时提供准确的结果。

如果您必须使用空气置换式移液器移液非常热或非常冷的液体，请不要预先冲洗移液器吸头，这通常是获得最准确度的最佳实践。相反，应迅速吸出和分液，以尽量减少液体温度对移液器内部气隙的影响。

为避免移液时产生气泡和起泡，请勿将吸头浸入储液器中超过 10 毫米，并缓慢吸出。

反向移液提供了额外的保护，因为在吸气之前，您将柱塞完全压到第 2 档，因此无法将空气注入液体样品。有关反向移液的更多信息，请访问 此页面。 

外置活塞式移液器在与液体相互作用时不会产生气泡或泡沫，因为其注射器式吸头不会为液体提供空气以与之相互作用。

用湿布和清洁剂（如异丙醇或 10% 漂白剂溶液）擦拭移液器，对移液器进行去污。避免使用千分尺的透明塑料窗口。

高压灭菌可能是另一种选择，但请检查移液器的仪器规格。如果是可高压灭菌的，是整个仪器进行高压灭菌还是仅对液体端进行高压灭菌？  通常，只有液体端可以进行高压灭菌。

有关清洁移液器的更多信息，请获取 清洁移液器 海报。

校准是对移液器的系统误差率（准确度）和随机误差率（精度）的受控和记录测量。在许多实验室环境中，移液器的性能必须根据法律在由认可机构认证的特定条件下进行定期测试和记录。 

经过 ISO 认证的供应商在受控环境中校准移液器。结果安全地记录在校准证书上，为每台仪器增加了可审计的性能历史记录。当需要调整时，ISO 认证的校准实验室会提供制造商推荐的零件和润滑剂的专家服务。 

Rainin和梅特勒-托利多是全球最大的移液器服务组织，提供从 邮寄到现场服务选项的快速周转。服务实验室已通过 ISO 17025 认证，程序遵循 2022 年 ISO 8655 更新。 

移液器准确度（或现在称为真实度）是所有测量值（4-10 次测量）的平均体积与设定体积之间的差值。 

精度是所执行的所有测量的标准偏差。其他读数与每个读数相距多远？

移液器的不确定度是其整体准确性的定量术语。它是真实度（系统误差的量度）和精度（随机误差的量度）的组合。 

不确定性方程为： 

不确定度 = 系统误差 + 随机误差 * k. k（覆盖因子或 Z 分数）取决于测量次数。K=3.31 四次测量，2 次测量 10 次。

将移液器垂直存放，挂在架子或移液器支架上。保持移液器清洁，无任何污染物。保持移液器吸头架关闭。