A molécula de interesse pode ser excretada ou pode se acumular dentro das células. Quando isso acontece, as células devem primeiro ser interrompidas, a degradação evitada e as impurezas separadas da molécula de interesse.

A centrifugação e a microfiltração são métodos ideais para separar a molécula da célula, e apenas o sobrenadante pode ser coletado para purificação posterior.

A medição em tempo real de pressão, fluxo, acúmulo de partículas , distribuição de tamanho, pH ou turbidez da célula que entra e sai dos filtros pode fornecer controle de feedback para minimizar a interrupção do processo.

Os vírus são inativados e tornados não patogênicos. Espectroscopia em linha , turbidez, monitoramento de pH e controle garantem consistência durante todo o processo.

O produto alvo é isolado e concentrado por cromatografia.

Enquanto os anticorpos são capturados por cromatografia de afinidade usando resinas com proteína A, proteína G ou outros métodos de engenharia seletiva, oligonucleotídeos e moléculas não proteicas são frequentemente capturados por cromatografia de troca iônica , polissacarídeos e glicano complexo por interação hidrofóbica ou cromatografia IMAC.

As medições comuns incluem pressão, fluxo, pH, espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourier (FTIR), UV-Vis e condutividade antes da coluna de cromatografia para monitorar entradas de alimentação variáveis e fornecer informações sobre a qualidade e o desempenho da coluna. 

Com a etapa de purificação, as impurezas residuais (como proteínas, ácidos nucléicos, endotoxinas, etc.) são removidas por meio de uma sucessão de operações unitárias - clarificação, extração, cromatografia, filtração de fluxo tangencial - enquanto o produto é retido o máximo possível e é ainda mais concentrado usando filtração de fluxo tangencial (TFF) via ultra/diafiltração (UF/DF).

O objetivo é aumentar a pureza sem perder o rendimento. O monitoramento do fluxo, pressão, condutividade, pH, turbidez e peso de escoamento durante a preparação e purificação do tampão garante confiabilidade durante todo o processo.

Os vírus são inativados e tornados não patogênicos para garantir a segurança dos bioterapêuticos , alterando o ambiente da solução (diminuindo o pH ou adicionando solventes/detergentes). Espectroscopia em linha, turbidez, monitoramento de pH e ORP e controle garantem consistência em todo o processo.

Com o polimento, a pureza final é alcançada.

Os cientistas usam cromatografia de exclusão de tamanho e filtração de fluxo tangencial para remover vestígios de impurezas - partículas virais, patógenos bacterianos e endotoxinas - e trocar o tampão de purificação pela formulação um.

Embora a espectroscopia FTIR possa ajudar a quantificar e especiar os componentes da fração durante a cromatografia de polimento, monitorando a pressão, o fluxo, a condutividade, o pH e a turbidez em todas as operações da unidade de polimento, incluindo a preparação do tampão, a garantia de segurança do produto e a qualidade.