Es müssen effiziente, flexible und kostengünstige Methoden für eine kontinuierliche Zellentfernung entwickelt werden, bevor eine dauerhafte und integrierte Produktschulung realisiert werden kann. Die Autoren beschreiben die Entwicklung und Prüfung eines solchen kontinuierlichen und frei verfügbaren Setups zur Zelltrennung durch Flockung in Kombination mit Tiefenfiltration.
Inline-Messungen mit ParticleTrack wurden nach der Zugabe von 0,0375 % pDADMAC am Auslass des rohrförmigen Reaktors durchgeführt (statisches Mischen). ParticleTrack (FBRM) überwacht die Flockengrösse, und bei Überlagerung mit zeitaufgelöstem Druck zeigt es die Annäherung an die Filtersättigung sowie Trends zu Druckereignissen an. Die verschiedenen Methoden und ausgewerteten Flockungsmitteltypen haben zu verschiedenen Ergebnissen im Hinblick auf die Gesamtausbeute, die Reinheit und den High Molecular Weight Index (HMWI) des Arzneimittelstoffs geführt. Die Ergebnisse zeigten ausserdem einen Zusammenhang zwischen abweichenden Partikelgrössenverteilungen und der gewählten Art des Flockungsmittels.
Diese Daten beruhen auf Publikationen, in denen ein Zusammenhang zu weiteren Flockungsparametern wie Konzentration des Flockungsreagenz, Mischstärke oder Scherkräfte, Resonanzzeit der Mischung, Temperatur, Startbedingungen und Zusammensetzung der Zellbrühe aufgezeigt wird. Im Vergleich zu einer herkömmlichen Filtrationsreihe, für die sich ParticleTrack (FBRM) gut eignete, konnten die erforderlichen Tiefenfiltrationsbereiche mithilfe von Flockung erfolgreich um den Faktor 4 reduziert werden, indem eine kontinuierliche Trennung der Antikörper etabliert wurde.
Burgstaller, D., Krepper, W., Haas, J., Maszelin, M., Mohoric, J., Pajnic, K., Jungbauer, A., & Satzer, P. (2018b). Continuous cell flocculation for recombinant antibody harvesting. Journal of Chemical Technology & Biotechnology, 93(7), 1881–1890. https://doi.org/10.1002/jctb.5500